湖北农业科学
湖北農業科學
호북농업과학
2011年
4期
849-853
,共5页
董立强%李梅%张燕燕%孙文丽%陈红漫%刘昱辉
董立彊%李梅%張燕燕%孫文麗%陳紅漫%劉昱輝
동립강%리매%장연연%손문려%진홍만%류욱휘
油体蛋白%人工油体%肠激酶%固定化酶
油體蛋白%人工油體%腸激酶%固定化酶
유체단백%인공유체%장격매%고정화매
为研究利用油体蛋白体外重组技术实现肠激酶固定化应用的可行性,利用油体蛋白Oleosin、自剪切蛋白Intein和人工合成的牛肠激酶轻链(Enterokinase,EK)cDNA,分别构建表达盒Intein-oleosin-EK和Intein-EK,插入毕赤酵母表达载体pPIC9K,转化毕赤酵母GS115,甲醇诱导表达后通过SDS-PAGE和Western-blot检测发现,带有Intein-肠激酶表达盒的阳性菌株中有目的蛋白的表达,而Oleosin-intein-肠激酶融合蛋白表达盒不能在酵母中表达.
為研究利用油體蛋白體外重組技術實現腸激酶固定化應用的可行性,利用油體蛋白Oleosin、自剪切蛋白Intein和人工閤成的牛腸激酶輕鏈(Enterokinase,EK)cDNA,分彆構建錶達盒Intein-oleosin-EK和Intein-EK,插入畢赤酵母錶達載體pPIC9K,轉化畢赤酵母GS115,甲醇誘導錶達後通過SDS-PAGE和Western-blot檢測髮現,帶有Intein-腸激酶錶達盒的暘性菌株中有目的蛋白的錶達,而Oleosin-intein-腸激酶融閤蛋白錶達盒不能在酵母中錶達.
위연구이용유체단백체외중조기술실현장격매고정화응용적가행성,이용유체단백Oleosin、자전절단백Intein화인공합성적우장격매경련(Enterokinase,EK)cDNA,분별구건표체합Intein-oleosin-EK화Intein-EK,삽입필적효모표체재체pPIC9K,전화필적효모GS115,갑순유도표체후통과SDS-PAGE화Western-blot검측발현,대유Intein-장격매표체합적양성균주중유목적단백적표체,이Oleosin-intein-장격매융합단백표체합불능재효모중표체.
