分析化学
分析化學
분석화학
CHINESE JOURNAL OF ANALYTICAL CHEMISTRY
2012年
6期
940-944
,共5页
王丽%张存政%刘媛%屠康%桑宏庆%刘贤进
王麗%張存政%劉媛%屠康%桑宏慶%劉賢進
왕려%장존정%류원%도강%상굉경%류현진
分子信标%适配体%有机磷农药%竞争抑制法
分子信標%適配體%有機燐農藥%競爭抑製法
분자신표%괄배체%유궤린농약%경쟁억제법
设计了一个长度为20个核苷酸的分子信标,建立了有机磷农药和分子信标竞争结合适配体鉴定其活性的方法,对前期筛选的两条适配体进行了活性位点分析和改造.结果表明,分子信标设计合理,性能稳定,其发夹结构在室温下既可成功闭合也可成功打开,最佳的活性鉴定条件为分子信标与适配体添加比例1.25∶1,孵育时间50 min,孵育温度为室温.活性位点分析表明Loop2-4是4种有机磷农药共有的活性位点,Loop2-3及SS4-54适配体5’端和3 '端残余的核苷酸是甲拌磷重要的活性位点,Loop2-2和Loop4-2是丙溴磷和水胺硫磷共有的活性位点,Loop4-3是丙溴磷和氧化乐果共有的活性位点,Loop2-1和Loop4-1是水胺硫磷重要的活性位点.通过基因拼接改造的SS24-PJ-35适配体对丙溴磷和水胺硫磷的结合活性明显提高.
設計瞭一箇長度為20箇覈苷痠的分子信標,建立瞭有機燐農藥和分子信標競爭結閤適配體鑒定其活性的方法,對前期篩選的兩條適配體進行瞭活性位點分析和改造.結果錶明,分子信標設計閤理,性能穩定,其髮夾結構在室溫下既可成功閉閤也可成功打開,最佳的活性鑒定條件為分子信標與適配體添加比例1.25∶1,孵育時間50 min,孵育溫度為室溫.活性位點分析錶明Loop2-4是4種有機燐農藥共有的活性位點,Loop2-3及SS4-54適配體5’耑和3 '耑殘餘的覈苷痠是甲拌燐重要的活性位點,Loop2-2和Loop4-2是丙溴燐和水胺硫燐共有的活性位點,Loop4-3是丙溴燐和氧化樂果共有的活性位點,Loop2-1和Loop4-1是水胺硫燐重要的活性位點.通過基因拼接改造的SS24-PJ-35適配體對丙溴燐和水胺硫燐的結閤活性明顯提高.
설계료일개장도위20개핵감산적분자신표,건립료유궤린농약화분자신표경쟁결합괄배체감정기활성적방법,대전기사선적량조괄배체진행료활성위점분석화개조.결과표명,분자신표설계합리,성능은정,기발협결구재실온하기가성공폐합야가성공타개,최가적활성감정조건위분자신표여괄배체첨가비례1.25∶1,부육시간50 min,부육온도위실온.활성위점분석표명Loop2-4시4충유궤린농약공유적활성위점,Loop2-3급SS4-54괄배체5’단화3 '단잔여적핵감산시갑반린중요적활성위점,Loop2-2화Loop4-2시병추린화수알류린공유적활성위점,Loop4-3시병추린화양화악과공유적활성위점,Loop2-1화Loop4-1시수알류린중요적활성위점.통과기인병접개조적SS24-PJ-35괄배체대병추린화수알류린적결합활성명현제고.
