热带医学杂志
熱帶醫學雜誌
열대의학잡지
JOURNAL OF TROPICAL MEDICINE
2004年
4期
382-384
,共3页
罗一鲁%陈建波%冯蝶仪%谭守勇%陈郁筠
囉一魯%陳建波%馮蝶儀%譚守勇%陳鬱筠
라일로%진건파%풍접의%담수용%진욱균
分支杆菌%抗原%Ag85B基因%重组体
分支桿菌%抗原%Ag85B基因%重組體
분지간균%항원%Ag85B기인%중조체
目的通过结核分支杆菌 Ag85B蛋白编码基因在大肠杆菌中稳定表达,以获得大量纯化的 Ag85B蛋白.方法采用 DNA重组技术构建结核分支杆菌 Ag85B基因的表达载体,双酶切和聚合酶链反应( PCR)鉴定重组子,阳性重组子转化大肠杆菌,并诱导表达外源蛋白.十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳( SDS PAGE)鉴定 Ag85B蛋白抗原在大肠杆菌中的表达,对染色的凝胶扫描,以测定目的蛋白表达水平.结果菌体蛋白经 SDS PAGE,含阳性重组质粒的菌体蛋白中出现一条新蛋白带,表达量占菌体总蛋白的 33%～ 38%.Ag85B蛋白抗原在大肠杆菌中表达方式主要是包涵体形式.结论 构建的大肠杆菌重组体能高效表达结核分支杆菌 Ag85B蛋白抗原.
目的通過結覈分支桿菌 Ag85B蛋白編碼基因在大腸桿菌中穩定錶達,以穫得大量純化的 Ag85B蛋白.方法採用 DNA重組技術構建結覈分支桿菌 Ag85B基因的錶達載體,雙酶切和聚閤酶鏈反應( PCR)鑒定重組子,暘性重組子轉化大腸桿菌,併誘導錶達外源蛋白.十二烷基磺痠鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳( SDS PAGE)鑒定 Ag85B蛋白抗原在大腸桿菌中的錶達,對染色的凝膠掃描,以測定目的蛋白錶達水平.結果菌體蛋白經 SDS PAGE,含暘性重組質粒的菌體蛋白中齣現一條新蛋白帶,錶達量佔菌體總蛋白的 33%～ 38%.Ag85B蛋白抗原在大腸桿菌中錶達方式主要是包涵體形式.結論 構建的大腸桿菌重組體能高效錶達結覈分支桿菌 Ag85B蛋白抗原.
목적통과결핵분지간균 Ag85B단백편마기인재대장간균중은정표체,이획득대량순화적 Ag85B단백.방법채용 DNA중조기술구건결핵분지간균 Ag85B기인적표체재체,쌍매절화취합매련반응( PCR)감정중조자,양성중조자전화대장간균,병유도표체외원단백.십이완기광산납취병희선알응효전영( SDS PAGE)감정 Ag85B단백항원재대장간균중적표체,대염색적응효소묘,이측정목적단백표체수평.결과균체단백경 SDS PAGE,함양성중조질립적균체단백중출현일조신단백대,표체량점균체총단백적 33%～ 38%.Ag85B단백항원재대장간균중표체방식주요시포함체형식.결론 구건적대장간균중조체능고효표체결핵분지간균 Ag85B단백항원.
