中国病毒学
中國病毒學
중국병독학
VIROLOGICA SINICA
2006年
1期
52-56
,共5页
李斗林%李艳秋%张珈敏%杨波%陈伍国%周伟东%胡远扬
李鬥林%李豔鞦%張珈敏%楊波%陳伍國%週偉東%鬍遠颺
리두림%리염추%장가민%양파%진오국%주위동%호원양
马尾松毛虫质型多角体病毒%多角体蛋白基因%杆状病毒转座载体%定位
馬尾鬆毛蟲質型多角體病毒%多角體蛋白基因%桿狀病毒轉座載體%定位
마미송모충질형다각체병독%다각체단백기인%간상병독전좌재체%정위
为了表达马尾松毛虫质型多角体病毒(DpCPV)多角体蛋白基因(S10片段)并探讨多角体蛋白在真核细胞中的定位,从DpCPV中分离出S10,与pET-28a载体连接成重组表达质粒pET28-S10;将S10克隆到杆状病毒转座载体pFASTBAC HTb中,依次筛选出重组转座质粒pFASTBAC S10,重组穿梭质粒Bacmid S10,重组杆状病毒Ac S10.多角体蛋白基因表达后,用SDS-PAGE、Western-blot和免疫荧光技术对表达产物进行了检测.结果表明:S10原核表达质粒、重组杆状病毒成功获得;在昆虫细胞中表达的质型多角体蛋白主要定位于细胞质,同时有少量产物定位于细胞核.
為瞭錶達馬尾鬆毛蟲質型多角體病毒(DpCPV)多角體蛋白基因(S10片段)併探討多角體蛋白在真覈細胞中的定位,從DpCPV中分離齣S10,與pET-28a載體連接成重組錶達質粒pET28-S10;將S10剋隆到桿狀病毒轉座載體pFASTBAC HTb中,依次篩選齣重組轉座質粒pFASTBAC S10,重組穿梭質粒Bacmid S10,重組桿狀病毒Ac S10.多角體蛋白基因錶達後,用SDS-PAGE、Western-blot和免疫熒光技術對錶達產物進行瞭檢測.結果錶明:S10原覈錶達質粒、重組桿狀病毒成功穫得;在昆蟲細胞中錶達的質型多角體蛋白主要定位于細胞質,同時有少量產物定位于細胞覈.
위료표체마미송모충질형다각체병독(DpCPV)다각체단백기인(S10편단)병탐토다각체단백재진핵세포중적정위,종DpCPV중분리출S10,여pET-28a재체련접성중조표체질립pET28-S10;장S10극륭도간상병독전좌재체pFASTBAC HTb중,의차사선출중조전좌질립pFASTBAC S10,중조천사질립Bacmid S10,중조간상병독Ac S10.다각체단백기인표체후,용SDS-PAGE、Western-blot화면역형광기술대표체산물진행료검측.결과표명:S10원핵표체질립、중조간상병독성공획득;재곤충세포중표체적질형다각체단백주요정위우세포질,동시유소양산물정위우세포핵.
