生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2008年
4期
695-699
,共5页
仇艳光%田景汉%葛荣朝%赵宝存%沈银柱%黄占景
仇豔光%田景漢%葛榮朝%趙寶存%瀋銀柱%黃佔景
구염광%전경한%갈영조%조보존%침은주%황점경
热不对称交错PCR%随机引物%启动子
熱不對稱交錯PCR%隨機引物%啟動子
열불대칭교착PCR%수궤인물%계동자
在经典TAIL-PCR(Thermal asymmetric interlaced PCR)的基础上,对其进行了如下四处改进:用10个碱基的RAPD引物代替16个碱基的随机兼并引物作为PCR中的随机引物;将较低特异性循环的复性温度由44℃降至29℃;增加5个高特异性反应循环,减少5个较低特异性反应循环;用单引物对第三轮PCR产物进行初步鉴定.利用改进的TAIL-PCR方法分离了小麦X基因的5'未知的侧翼序列,与GUS基因融合后转入拟南芥,通过组织化学检测分析表明分离到的5'侧翼序列具有启动子功能,同时说明改进的TAIL-PCR能更好地应用到较复杂基因启动子的分离.
在經典TAIL-PCR(Thermal asymmetric interlaced PCR)的基礎上,對其進行瞭如下四處改進:用10箇堿基的RAPD引物代替16箇堿基的隨機兼併引物作為PCR中的隨機引物;將較低特異性循環的複性溫度由44℃降至29℃;增加5箇高特異性反應循環,減少5箇較低特異性反應循環;用單引物對第三輪PCR產物進行初步鑒定.利用改進的TAIL-PCR方法分離瞭小麥X基因的5'未知的側翼序列,與GUS基因融閤後轉入擬南芥,通過組織化學檢測分析錶明分離到的5'側翼序列具有啟動子功能,同時說明改進的TAIL-PCR能更好地應用到較複雜基因啟動子的分離.
재경전TAIL-PCR(Thermal asymmetric interlaced PCR)적기출상,대기진행료여하사처개진:용10개감기적RAPD인물대체16개감기적수궤겸병인물작위PCR중적수궤인물;장교저특이성순배적복성온도유44℃강지29℃;증가5개고특이성반응순배,감소5개교저특이성반응순배;용단인물대제삼륜PCR산물진행초보감정.이용개진적TAIL-PCR방법분리료소맥X기인적5'미지적측익서렬,여GUS기인융합후전입의남개,통과조직화학검측분석표명분리도적5'측익서렬구유계동자공능,동시설명개진적TAIL-PCR능경호지응용도교복잡기인계동자적분리.
