中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2008年
5期
390-393
,共4页
张鑫%朱明光%袁红艳%杨巍%常雅萍
張鑫%硃明光%袁紅豔%楊巍%常雅萍
장흠%주명광%원홍염%양외%상아평
HMGA1%NIH3T3%基因转染%细胞转化
HMGA1%NIH3T3%基因轉染%細胞轉化
HMGA1%NIH3T3%기인전염%세포전화
目的:通过建立稳定转染外源HMGA1基因的NIH3T3细胞,探讨HMGA1基因表达与肿瘤发生、发展的相关性.方法:脂质体转染法将真核表达载体pcDNA3.0-HMGA1稳定转染NIH3T3细胞,G418筛选获得阳性细胞克隆;RT-PCR法及基因测序技术,确定外源HMGA1基因在阳性细胞克隆转录水平的表达;MTT法绘制细胞生长曲线以及流式细胞术测定细胞周期观察细胞增殖能力的变化;软琼脂集落形成实验判断转染细胞的非锚定依赖性生长能力;RT-PCR法检测转染细胞免疫抑制因子VEGF和FasL mRNA表达.结果:筛选获得稳定转染HMGA1基因的NIH3T3细胞克隆,与对照细胞相比稳定转染HMGA1基因,细胞生长增殖速度加快,在软琼脂中形成细胞集落,并表达免疫抑制因子VEGF和FasL mRNA.结论:HMGA1基因转染可诱导正常NIH3T3细胞恶性转化,并参与调控免疫抑制因子 mRNA表达,揭示HMGA1是肿瘤发生发展、转移以及免疫逃逸的关键分子.
目的:通過建立穩定轉染外源HMGA1基因的NIH3T3細胞,探討HMGA1基因錶達與腫瘤髮生、髮展的相關性.方法:脂質體轉染法將真覈錶達載體pcDNA3.0-HMGA1穩定轉染NIH3T3細胞,G418篩選穫得暘性細胞剋隆;RT-PCR法及基因測序技術,確定外源HMGA1基因在暘性細胞剋隆轉錄水平的錶達;MTT法繪製細胞生長麯線以及流式細胞術測定細胞週期觀察細胞增殖能力的變化;軟瓊脂集落形成實驗判斷轉染細胞的非錨定依賴性生長能力;RT-PCR法檢測轉染細胞免疫抑製因子VEGF和FasL mRNA錶達.結果:篩選穫得穩定轉染HMGA1基因的NIH3T3細胞剋隆,與對照細胞相比穩定轉染HMGA1基因,細胞生長增殖速度加快,在軟瓊脂中形成細胞集落,併錶達免疫抑製因子VEGF和FasL mRNA.結論:HMGA1基因轉染可誘導正常NIH3T3細胞噁性轉化,併參與調控免疫抑製因子 mRNA錶達,揭示HMGA1是腫瘤髮生髮展、轉移以及免疫逃逸的關鍵分子.
목적:통과건립은정전염외원HMGA1기인적NIH3T3세포,탐토HMGA1기인표체여종류발생、발전적상관성.방법:지질체전염법장진핵표체재체pcDNA3.0-HMGA1은정전염NIH3T3세포,G418사선획득양성세포극륭;RT-PCR법급기인측서기술,학정외원HMGA1기인재양성세포극륭전록수평적표체;MTT법회제세포생장곡선이급류식세포술측정세포주기관찰세포증식능력적변화;연경지집락형성실험판단전염세포적비묘정의뢰성생장능력;RT-PCR법검측전염세포면역억제인자VEGF화FasL mRNA표체.결과:사선획득은정전염HMGA1기인적NIH3T3세포극륭,여대조세포상비은정전염HMGA1기인,세포생장증식속도가쾌,재연경지중형성세포집락,병표체면역억제인자VEGF화FasL mRNA.결론:HMGA1기인전염가유도정상NIH3T3세포악성전화,병삼여조공면역억제인자 mRNA표체,게시HMGA1시종류발생발전、전이이급면역도일적관건분자.
