南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2006年
11期
1552-1555
,共4页
邵紫韫%刘志锋%彭毅%徐佳%邓鹏%姜勇
邵紫韞%劉誌鋒%彭毅%徐佳%鄧鵬%薑勇
소자운%류지봉%팽의%서가%산붕%강용
γ-干扰素诱导蛋白10%增强型绿色荧光蛋白%腺病毒
γ-榦擾素誘導蛋白10%增彊型綠色熒光蛋白%腺病毒
γ-간우소유도단백10%증강형록색형광단백%선병독
目的 利用细菌内同源重组法构建带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标签的γ-干扰素诱导蛋白10(IP-10)重组腺病毒载体并制备重组腺病毒.方法 将IP-10编码序列克隆入带有EGFP示踪的腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV中,形成转移载体pAdTrack-CMV/IP-10,将其在大肠杆菌BJ5183内与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1同源重组,得到重组腺病毒载体pAd/IP-10;酶切鉴定正确后转染HEK293细胞.收集病毒上清,PCR鉴定正确后,扩增并再次感染HEK293细胞检测病毒感染能力.结果 重组质粒经酶切、PCR和测序鉴定正确无误,并在HEK293细胞中包装成有感染活性的病毒颗粒.结论 成功地构建了表达IP-10蛋白的重组腺病毒载体并制备了重组腺病毒Ad/IP-10,为研究IP-10的蛋白功能提供了一个重要工具.
目的 利用細菌內同源重組法構建帶有增彊型綠色熒光蛋白(EGFP)標籤的γ-榦擾素誘導蛋白10(IP-10)重組腺病毒載體併製備重組腺病毒.方法 將IP-10編碼序列剋隆入帶有EGFP示蹤的腺病毒穿梭質粒pAdTrack-CMV中,形成轉移載體pAdTrack-CMV/IP-10,將其在大腸桿菌BJ5183內與腺病毒骨架質粒pAdEasy-1同源重組,得到重組腺病毒載體pAd/IP-10;酶切鑒定正確後轉染HEK293細胞.收集病毒上清,PCR鑒定正確後,擴增併再次感染HEK293細胞檢測病毒感染能力.結果 重組質粒經酶切、PCR和測序鑒定正確無誤,併在HEK293細胞中包裝成有感染活性的病毒顆粒.結論 成功地構建瞭錶達IP-10蛋白的重組腺病毒載體併製備瞭重組腺病毒Ad/IP-10,為研究IP-10的蛋白功能提供瞭一箇重要工具.
목적 이용세균내동원중조법구건대유증강형록색형광단백(EGFP)표첨적γ-간우소유도단백10(IP-10)중조선병독재체병제비중조선병독.방법 장IP-10편마서렬극륭입대유EGFP시종적선병독천사질립pAdTrack-CMV중,형성전이재체pAdTrack-CMV/IP-10,장기재대장간균BJ5183내여선병독골가질립pAdEasy-1동원중조,득도중조선병독재체pAd/IP-10;매절감정정학후전염HEK293세포.수집병독상청,PCR감정정학후,확증병재차감염HEK293세포검측병독감염능력.결과 중조질립경매절、PCR화측서감정정학무오,병재HEK293세포중포장성유감염활성적병독과립.결론 성공지구건료표체IP-10단백적중조선병독재체병제비료중조선병독Ad/IP-10,위연구IP-10적단백공능제공료일개중요공구.
