畜牧与兽医
畜牧與獸醫
축목여수의
ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2010年
5期
55-58
,共4页
贺英%曹旺斌%夏润玺%张曼夫
賀英%曹旺斌%夏潤璽%張曼伕
하영%조왕빈%하윤새%장만부
犬细小病毒%SiRNA干扰%复制%质粒
犬細小病毒%SiRNA榦擾%複製%質粒
견세소병독%SiRNA간우%복제%질립
RNA干扰(RNAi)是指短的双链RNA能降解与其互补mRNA,特异性诱发转录后基因沉默的现象,近年来成为抗病毒研究的新途径.为了探索siRNA对单链DNA病毒复制的影响,根据犬细小病毒((CPV)基因组序列选择4段21nt的保守序列设计4对SiRNA寡聚核苷酸,插入psiSTRIKE系列的U6发卡结构载体,构建了小发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)的psiSTRIKE表达载体,转染FK81细胞,筛选稳定的转染细胞,通过病毒感染检测、细胞活度测定和TCID50测定,研究质粒介导的siRNA对CPV复制的影响.结果表明,构建的4个psiSTRIKE表达载体转染细胞后,能够不同程度地抑制病毒在宿主细胞内的复制.因此质粒介导的shRNA能抑制CPV在细胞内的复制和感染,具有抗病毒作用,从而为进一步通过siRNA途径控制病毒奠定基础.
RNA榦擾(RNAi)是指短的雙鏈RNA能降解與其互補mRNA,特異性誘髮轉錄後基因沉默的現象,近年來成為抗病毒研究的新途徑.為瞭探索siRNA對單鏈DNA病毒複製的影響,根據犬細小病毒((CPV)基因組序列選擇4段21nt的保守序列設計4對SiRNA寡聚覈苷痠,插入psiSTRIKE繫列的U6髮卡結構載體,構建瞭小髮夾RNA(short hairpin RNA,shRNA)的psiSTRIKE錶達載體,轉染FK81細胞,篩選穩定的轉染細胞,通過病毒感染檢測、細胞活度測定和TCID50測定,研究質粒介導的siRNA對CPV複製的影響.結果錶明,構建的4箇psiSTRIKE錶達載體轉染細胞後,能夠不同程度地抑製病毒在宿主細胞內的複製.因此質粒介導的shRNA能抑製CPV在細胞內的複製和感染,具有抗病毒作用,從而為進一步通過siRNA途徑控製病毒奠定基礎.
RNA간우(RNAi)시지단적쌍련RNA능강해여기호보mRNA,특이성유발전록후기인침묵적현상,근년래성위항병독연구적신도경.위료탐색siRNA대단련DNA병독복제적영향,근거견세소병독((CPV)기인조서렬선택4단21nt적보수서렬설계4대SiRNA과취핵감산,삽입psiSTRIKE계렬적U6발잡결구재체,구건료소발협RNA(short hairpin RNA,shRNA)적psiSTRIKE표체재체,전염FK81세포,사선은정적전염세포,통과병독감염검측、세포활도측정화TCID50측정,연구질립개도적siRNA대CPV복제적영향.결과표명,구건적4개psiSTRIKE표체재체전염세포후,능구불동정도지억제병독재숙주세포내적복제.인차질립개도적shRNA능억제CPV재세포내적복제화감염,구유항병독작용,종이위진일보통과siRNA도경공제병독전정기출.
