南通大学学报（医学版）
南通大學學報（醫學版）
남통대학학보（의학판）
JOURNAL OF NANTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2011年
4期
243-247,封2
,共6页
嵌合蛋白疫苗%OmpC%乙型肝炎病毒转基因小鼠%免疫
嵌閤蛋白疫苗%OmpC%乙型肝炎病毒轉基因小鼠%免疫
감합단백역묘%OmpC%을형간염병독전기인소서%면역
目的:构建OmpC-HBsAg'a'表位嵌合蛋白疫苗来研究对HBV转基因小鼠的免疫效果.方法:将HBsAg'a'抗原决定簇主要肽段S-(124-147aa)插入到沙门氏菌外膜孔道蛋白OmpC第4 Loop区,并运用DsbA进行辅助二硫键形成,对HBV转基因小鼠免疫,激活固有免疫系统中的B-1细胞产生HBsAb.结果:HBsAg的adr 'a'表位CTSPAQGTSMFPSCCCTKPSDGNC成功插入OmpC-HBsAg 'a'基因的588～659 bp之间,重组后的载体PCR鉴定和测序结果完全与设计相一致.IPTG诱导表达后,荧光显微镜显示3E7抗体能够识别BL21外膜表面的OmpC-HBsAg'a'表位嵌合蛋白,用表达该蛋白的BL21直接免疫HBV转基因小鼠,能够产生HBsAb抗体.结论:OmpC-HBsAg'a'表位嵌合蛋白在原核中表达具有天然构象,以此蛋白为基础的疫苗能够打破HBV转基因小鼠对HBsAg的免疫耐受.
目的:構建OmpC-HBsAg'a'錶位嵌閤蛋白疫苗來研究對HBV轉基因小鼠的免疫效果.方法:將HBsAg'a'抗原決定簇主要肽段S-(124-147aa)插入到沙門氏菌外膜孔道蛋白OmpC第4 Loop區,併運用DsbA進行輔助二硫鍵形成,對HBV轉基因小鼠免疫,激活固有免疫繫統中的B-1細胞產生HBsAb.結果:HBsAg的adr 'a'錶位CTSPAQGTSMFPSCCCTKPSDGNC成功插入OmpC-HBsAg 'a'基因的588～659 bp之間,重組後的載體PCR鑒定和測序結果完全與設計相一緻.IPTG誘導錶達後,熒光顯微鏡顯示3E7抗體能夠識彆BL21外膜錶麵的OmpC-HBsAg'a'錶位嵌閤蛋白,用錶達該蛋白的BL21直接免疫HBV轉基因小鼠,能夠產生HBsAb抗體.結論:OmpC-HBsAg'a'錶位嵌閤蛋白在原覈中錶達具有天然構象,以此蛋白為基礎的疫苗能夠打破HBV轉基因小鼠對HBsAg的免疫耐受.
목적:구건OmpC-HBsAg'a'표위감합단백역묘래연구대HBV전기인소서적면역효과.방법:장HBsAg'a'항원결정족주요태단S-(124-147aa)삽입도사문씨균외막공도단백OmpC제4 Loop구,병운용DsbA진행보조이류건형성,대HBV전기인소서면역,격활고유면역계통중적B-1세포산생HBsAb.결과:HBsAg적adr 'a'표위CTSPAQGTSMFPSCCCTKPSDGNC성공삽입OmpC-HBsAg 'a'기인적588～659 bp지간,중조후적재체PCR감정화측서결과완전여설계상일치.IPTG유도표체후,형광현미경현시3E7항체능구식별BL21외막표면적OmpC-HBsAg'a'표위감합단백,용표체해단백적BL21직접면역HBV전기인소서,능구산생HBsAb항체.결론:OmpC-HBsAg'a'표위감합단백재원핵중표체구유천연구상,이차단백위기출적역묘능구타파HBV전기인소서대HBsAg적면역내수.
