畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2011年
9期
1233-1238
,共6页
王静%林嘉鹏%石庆华%陈博%汪立芹%赵云程%黄俊成
王靜%林嘉鵬%石慶華%陳博%汪立芹%趙雲程%黃俊成
왕정%림가붕%석경화%진박%왕립근%조운정%황준성
母源基因%玻璃化冷冻%荧光实时定量PCR
母源基因%玻璃化冷凍%熒光實時定量PCR
모원기인%파리화냉동%형광실시정량PCR
为详细了解玻璃化冷冻对绵羊卵母细胞中母源基因mRNA表达量的影响,分别玻璃化冷冻GV期和IVM 期(18、24 h)绵羊卵母细胞,解冻后进行体外培养.GV期和IVM期卵母细胞经过冷冻-解冻后,卵裂率(10.37％、23.17％、33.07％)均极显著低于对照组(82.96％,P＜0.01),且冷冻-解冻后的GV期卵母细胞卵裂率极显著低于冷冻-解冻后的IVM期卵母细胞(P＜0.01).本试验利用荧光实时定量PCR技术检测4种母源基因:Gdf9(生长分化因子-9)、Zar1(合子阻泄因子)、Mater(胚胎必要的母体抗原)、Dnmt1(DNA甲基化转移酶1)在不同处理后的绵羊卵母细胞中的mRNA含量.结果表明,4个基因的mRNA在GV期的表达量均高于IVM期的卵母细胞(P＜0.01);经玻璃化冷冻处理后,4个基因的mRNA表达量升高,其中GV期含量最高(P＜0.01).结果提示,绵羊GV或IVM期卵母细胞玻璃化冷冻导致母源基因mRNA表达量升高,可能会对胚胎发育产生负面影响.
為詳細瞭解玻璃化冷凍對綿羊卵母細胞中母源基因mRNA錶達量的影響,分彆玻璃化冷凍GV期和IVM 期(18、24 h)綿羊卵母細胞,解凍後進行體外培養.GV期和IVM期卵母細胞經過冷凍-解凍後,卵裂率(10.37％、23.17％、33.07％)均極顯著低于對照組(82.96％,P＜0.01),且冷凍-解凍後的GV期卵母細胞卵裂率極顯著低于冷凍-解凍後的IVM期卵母細胞(P＜0.01).本試驗利用熒光實時定量PCR技術檢測4種母源基因:Gdf9(生長分化因子-9)、Zar1(閤子阻洩因子)、Mater(胚胎必要的母體抗原)、Dnmt1(DNA甲基化轉移酶1)在不同處理後的綿羊卵母細胞中的mRNA含量.結果錶明,4箇基因的mRNA在GV期的錶達量均高于IVM期的卵母細胞(P＜0.01);經玻璃化冷凍處理後,4箇基因的mRNA錶達量升高,其中GV期含量最高(P＜0.01).結果提示,綿羊GV或IVM期卵母細胞玻璃化冷凍導緻母源基因mRNA錶達量升高,可能會對胚胎髮育產生負麵影響.
위상세료해파리화냉동대면양란모세포중모원기인mRNA표체량적영향,분별파리화냉동GV기화IVM 기(18、24 h)면양란모세포,해동후진행체외배양.GV기화IVM기란모세포경과냉동-해동후,란렬솔(10.37％、23.17％、33.07％)균겁현저저우대조조(82.96％,P＜0.01),차냉동-해동후적GV기란모세포란렬솔겁현저저우냉동-해동후적IVM기란모세포(P＜0.01).본시험이용형광실시정량PCR기술검측4충모원기인:Gdf9(생장분화인자-9)、Zar1(합자조설인자)、Mater(배태필요적모체항원)、Dnmt1(DNA갑기화전이매1)재불동처리후적면양란모세포중적mRNA함량.결과표명,4개기인적mRNA재GV기적표체량균고우IVM기적란모세포(P＜0.01);경파리화냉동처리후,4개기인적mRNA표체량승고,기중GV기함량최고(P＜0.01).결과제시,면양GV혹IVM기란모세포파리화냉동도치모원기인mRNA표체량승고,가능회대배태발육산생부면영향.
