中国酿造
中國釀造
중국양조
CHINA BREWING
2012年
4期
158-162
,共5页
姚蕾%汪金林%郑云峰%李博斌%励建荣
姚蕾%汪金林%鄭雲峰%李博斌%勵建榮
요뢰%왕금림%정운봉%리박빈%려건영
单增李斯特菌%蜡样芽孢杆菌%金黄色葡萄球菌%三重荧光PCR
單增李斯特菌%蠟樣芽孢桿菌%金黃色葡萄毬菌%三重熒光PCR
단증리사특균%사양아포간균%금황색포도구균%삼중형광PCR
为了建立传统发酵豆制品中单增李斯特菌、蜡样芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的三重荧光PCR快速检测方法.以单增李斯特菌hly A基因、蜡样芽孢杆菌Cereolysin AB基因和金黄色葡萄球菌nuc基因为靶基因设计引物与TaqMan探针,通过优化PCR反应体系,建立了可同时检测单增李斯特菌、蜡样芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的三重荧光定量PCR体系,并进行了特异性和敏感性试验.结果显示,该方法灵敏度高,特异性强,重复性好.对26株非目标菌进行检测,结果均为阴性,而定量检测批内和批间的变异系数均小于2％.单增李斯特菌、蜡样芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌敏感性试验结果表明,这三种细菌的最低检测浓度分别为3×103cfu/mL、2× 104cfu/mL、2× 104 cfu/mL.应用该方法可在8h内完成对样品中单增李斯特菌、蜡样芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的同步检测.
為瞭建立傳統髮酵豆製品中單增李斯特菌、蠟樣芽孢桿菌和金黃色葡萄毬菌的三重熒光PCR快速檢測方法.以單增李斯特菌hly A基因、蠟樣芽孢桿菌Cereolysin AB基因和金黃色葡萄毬菌nuc基因為靶基因設計引物與TaqMan探針,通過優化PCR反應體繫,建立瞭可同時檢測單增李斯特菌、蠟樣芽孢桿菌和金黃色葡萄毬菌的三重熒光定量PCR體繫,併進行瞭特異性和敏感性試驗.結果顯示,該方法靈敏度高,特異性彊,重複性好.對26株非目標菌進行檢測,結果均為陰性,而定量檢測批內和批間的變異繫數均小于2％.單增李斯特菌、蠟樣芽孢桿菌和金黃色葡萄毬菌敏感性試驗結果錶明,這三種細菌的最低檢測濃度分彆為3×103cfu/mL、2× 104cfu/mL、2× 104 cfu/mL.應用該方法可在8h內完成對樣品中單增李斯特菌、蠟樣芽孢桿菌和金黃色葡萄毬菌的同步檢測.
위료건립전통발효두제품중단증리사특균、사양아포간균화금황색포도구균적삼중형광PCR쾌속검측방법.이단증리사특균hly A기인、사양아포간균Cereolysin AB기인화금황색포도구균nuc기인위파기인설계인물여TaqMan탐침,통과우화PCR반응체계,건립료가동시검측단증리사특균、사양아포간균화금황색포도구균적삼중형광정량PCR체계,병진행료특이성화민감성시험.결과현시,해방법령민도고,특이성강,중복성호.대26주비목표균진행검측,결과균위음성,이정량검측비내화비간적변이계수균소우2％.단증리사특균、사양아포간균화금황색포도구균민감성시험결과표명,저삼충세균적최저검측농도분별위3×103cfu/mL、2× 104cfu/mL、2× 104 cfu/mL.응용해방법가재8h내완성대양품중단증리사특균、사양아포간균화금황색포도구균적동보검측.
