军事医学科学院院刊
軍事醫學科學院院刊
군사의학과학원원간
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2005年
3期
236-240
,共5页
李燕杰%李吉学%凌焱%汤国营%宋子博%林艳丽%朱厚础
李燕傑%李吉學%凌焱%湯國營%宋子博%林豔麗%硃厚礎
리연걸%리길학%릉염%탕국영%송자박%림염려%주후출
乙酰肝素酶%氨基端亚基蛋白%融合表达%纯化%肿瘤转移
乙酰肝素酶%氨基耑亞基蛋白%融閤錶達%純化%腫瘤轉移
을선간소매%안기단아기단백%융합표체%순화%종류전이
目的:乙酰肝素酶在肿瘤转移的过程中起重要作用,其氨基端小亚基蛋白(Mr为8×103)对其功能活性是不可缺少的.得到此蛋白将有助于深入研究乙酰肝素酶的功能活性.方法:我们从人胎盘cDNA文库中分离乙酰肝素酶蛋白全长编码基因,将乙酰肝素酶氨基端小亚基的基因克隆入pGEX-2TK,转化大肠杆菌进行融合表达.经发酵,纯化,复性得到乙酰肝素酶的氨基端亚基蛋白.结果:得到6.9 g纯度>90%的氨基端小亚基融合蛋白.GST pull-down实验表明,此融合蛋白可与乙酰肝素酶羧基端大亚基蛋白结合.复性后的融合蛋白可被激酶切割为GST蛋白和乙酰肝素酶氨基端亚基蛋白.结论:所得的乙酰肝素酶的氨基端小亚基蛋白为进一步研究该亚基蛋白在细胞内的免疫亚定位及功能奠定了基础.
目的:乙酰肝素酶在腫瘤轉移的過程中起重要作用,其氨基耑小亞基蛋白(Mr為8×103)對其功能活性是不可缺少的.得到此蛋白將有助于深入研究乙酰肝素酶的功能活性.方法:我們從人胎盤cDNA文庫中分離乙酰肝素酶蛋白全長編碼基因,將乙酰肝素酶氨基耑小亞基的基因剋隆入pGEX-2TK,轉化大腸桿菌進行融閤錶達.經髮酵,純化,複性得到乙酰肝素酶的氨基耑亞基蛋白.結果:得到6.9 g純度>90%的氨基耑小亞基融閤蛋白.GST pull-down實驗錶明,此融閤蛋白可與乙酰肝素酶羧基耑大亞基蛋白結閤.複性後的融閤蛋白可被激酶切割為GST蛋白和乙酰肝素酶氨基耑亞基蛋白.結論:所得的乙酰肝素酶的氨基耑小亞基蛋白為進一步研究該亞基蛋白在細胞內的免疫亞定位及功能奠定瞭基礎.
목적:을선간소매재종류전이적과정중기중요작용,기안기단소아기단백(Mr위8×103)대기공능활성시불가결소적.득도차단백장유조우심입연구을선간소매적공능활성.방법:아문종인태반cDNA문고중분리을선간소매단백전장편마기인,장을선간소매안기단소아기적기인극륭입pGEX-2TK,전화대장간균진행융합표체.경발효,순화,복성득도을선간소매적안기단아기단백.결과:득도6.9 g순도>90%적안기단소아기융합단백.GST pull-down실험표명,차융합단백가여을선간소매최기단대아기단백결합.복성후적융합단백가피격매절할위GST단백화을선간소매안기단아기단백.결론:소득적을선간소매적안기단소아기단백위진일보연구해아기단백재세포내적면역아정위급공능전정료기출.
