中国血吸虫病防治杂志
中國血吸蟲病防治雜誌
중국혈흡충병방치잡지
CHINESE JOURNAL OF SCHISTOSOMIASIS CONTROL
2005年
4期
241-245
,共5页
朱毅%朱进%冯振卿%徐璐%李芸茜%仇镇宁%管晓虹
硃毅%硃進%馮振卿%徐璐%李蕓茜%仇鎮寧%管曉虹
주의%주진%풍진경%서로%리예천%구진저%관효홍
日本血吸虫%抗抗独特型抗体%双链抗体%蛋白表达%Dot-ELISA
日本血吸蟲%抗抗獨特型抗體%雙鏈抗體%蛋白錶達%Dot-ELISA
일본혈흡충%항항독특형항체%쌍련항체%단백표체%Dot-ELISA
目的构建和表达日本血吸虫单克隆抗抗独特型抗体NP48单特异性双链抗体,并初步鉴定表达产物活性.方法应用SOE法扩增双链抗体基因VH-linker-VL(Diabody,简称D).将D重组入原核表达载体pBAD/gⅢ.表达质粒转化E.coli TOP10,左旋阿拉伯糖诱导表达.对D的表达产物进行分离纯化,采用Dot-ELISA法检测纯化蛋白与NP30、可溶性虫卵抗原(SEA)、可溶性成虫抗原(SWAP)的结合活性.结果测序证实双链抗体基因D构建成功;构建了D的原核表达系统,诱导表达产物主要以包涵体形式存在,分子量约为27 kD;经纯化、变性复性后用Dot-ELISA法鉴定结果表明,D表达的纯化蛋白可与NP30特异性结合.结论所构建、表达的NP48单特异性双链抗体具有亲本单抗的部分特性.
目的構建和錶達日本血吸蟲單剋隆抗抗獨特型抗體NP48單特異性雙鏈抗體,併初步鑒定錶達產物活性.方法應用SOE法擴增雙鏈抗體基因VH-linker-VL(Diabody,簡稱D).將D重組入原覈錶達載體pBAD/gⅢ.錶達質粒轉化E.coli TOP10,左鏇阿拉伯糖誘導錶達.對D的錶達產物進行分離純化,採用Dot-ELISA法檢測純化蛋白與NP30、可溶性蟲卵抗原(SEA)、可溶性成蟲抗原(SWAP)的結閤活性.結果測序證實雙鏈抗體基因D構建成功;構建瞭D的原覈錶達繫統,誘導錶達產物主要以包涵體形式存在,分子量約為27 kD;經純化、變性複性後用Dot-ELISA法鑒定結果錶明,D錶達的純化蛋白可與NP30特異性結閤.結論所構建、錶達的NP48單特異性雙鏈抗體具有親本單抗的部分特性.
목적구건화표체일본혈흡충단극륭항항독특형항체NP48단특이성쌍련항체,병초보감정표체산물활성.방법응용SOE법확증쌍련항체기인VH-linker-VL(Diabody,간칭D).장D중조입원핵표체재체pBAD/gⅢ.표체질립전화E.coli TOP10,좌선아랍백당유도표체.대D적표체산물진행분리순화,채용Dot-ELISA법검측순화단백여NP30、가용성충란항원(SEA)、가용성성충항원(SWAP)적결합활성.결과측서증실쌍련항체기인D구건성공;구건료D적원핵표체계통,유도표체산물주요이포함체형식존재,분자량약위27 kD;경순화、변성복성후용Dot-ELISA법감정결과표명,D표체적순화단백가여NP30특이성결합.결론소구건、표체적NP48단특이성쌍련항체구유친본단항적부분특성.
