山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2006年
8期
25-26
,共2页
直肠瘘%成纤维细胞%细胞,培养的%免疫组织化学
直腸瘺%成纖維細胞%細胞,培養的%免疫組織化學
직장루%성섬유세포%세포,배양적%면역조직화학
通过组织块法分离并原代培养人肛瘘管壁组织,用胰蛋白酶和乙二胺四乙酸(EDTA)消化成纤维细胞、上皮细胞,获得更加纯化的成纤维细胞;以DMEM培养液为基础培养基,添加胎牛血清(体积分数10%)、青霉素(100U/L)和硫酸链霉素(100U/L),置37℃、5%CO2培养箱中培养.倒置相差显微镜和细胞爬片HE染色,观察成纤维细胞形态结构,并对培养成纤维细胞行角蛋白、波形蛋白免疫细胞化学鉴定.结果分离后的成纤维细胞在第4～12h于体外快速贴壁,第2～4天进入对数期生长、增殖期.细胞起源鉴定波形蛋白免疫细胞化学染色为阳性,角蛋白免疫细胞化学染色为阴性.提示该方法所获得的肛瘘管壁成纤维细胞可在体外稳定培养,不含有杂质细胞,可为在细胞分子水平上研究肛瘘瘘管愈合的机制提供可靠的细胞模型.
通過組織塊法分離併原代培養人肛瘺管壁組織,用胰蛋白酶和乙二胺四乙痠(EDTA)消化成纖維細胞、上皮細胞,穫得更加純化的成纖維細胞;以DMEM培養液為基礎培養基,添加胎牛血清(體積分數10%)、青黴素(100U/L)和硫痠鏈黴素(100U/L),置37℃、5%CO2培養箱中培養.倒置相差顯微鏡和細胞爬片HE染色,觀察成纖維細胞形態結構,併對培養成纖維細胞行角蛋白、波形蛋白免疫細胞化學鑒定.結果分離後的成纖維細胞在第4～12h于體外快速貼壁,第2～4天進入對數期生長、增殖期.細胞起源鑒定波形蛋白免疫細胞化學染色為暘性,角蛋白免疫細胞化學染色為陰性.提示該方法所穫得的肛瘺管壁成纖維細胞可在體外穩定培養,不含有雜質細胞,可為在細胞分子水平上研究肛瘺瘺管愈閤的機製提供可靠的細胞模型.
통과조직괴법분리병원대배양인항루관벽조직,용이단백매화을이알사을산(EDTA)소화성섬유세포、상피세포,획득경가순화적성섬유세포;이DMEM배양액위기출배양기,첨가태우혈청(체적분수10%)、청매소(100U/L)화류산련매소(100U/L),치37℃、5%CO2배양상중배양.도치상차현미경화세포파편HE염색,관찰성섬유세포형태결구,병대배양성섬유세포행각단백、파형단백면역세포화학감정.결과분리후적성섬유세포재제4～12h우체외쾌속첩벽,제2～4천진입대수기생장、증식기.세포기원감정파형단백면역세포화학염색위양성,각단백면역세포화학염색위음성.제시해방법소획득적항루관벽성섬유세포가재체외은정배양,불함유잡질세포,가위재세포분자수평상연구항루루관유합적궤제제공가고적세포모형.
