山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2008年
12期
45-46
,共2页
武鸿斌%宋燕%谢忠士%刘志毅%姜洋%柳福海%赵航
武鴻斌%宋燕%謝忠士%劉誌毅%薑洋%柳福海%趙航
무홍빈%송연%사충사%류지의%강양%류복해%조항
第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因%真核表达载体%绿色荧光蛋白%基因转染
第10號染色體缺失的燐痠酶和張力蛋白同源基因%真覈錶達載體%綠色熒光蛋白%基因轉染
제10호염색체결실적린산매화장력단백동원기인%진핵표체재체%록색형광단백%기인전염
采用分子克隆技术构建重组质粒人野生型PTEN绿色荧光蛋白真核表达载体(pEGFP-C1-PTEN),以脂质体转染法转染人乳腺癌细胞株ZR-75-1中,应用RT-PCR、Western印迹法分析目的 基因的表达.双酶切和特异PCR结果表明克隆的基因片段约1.2 kb,测序法进一步证实该基因为PTEN编码基因,经NCBIBLAST分析与Gene Bank中基因序列完全相同;RT-PCR、Western印迹显示pEGFP-C1-PTEN转染组有PTENmRNA及PTEN蛋白表达.成功构建了人野生型PTEN绿色荧光蛋白真核表达载体pEGFP-C1-PTEN,并将其成功转染入乳腺癌细胞ZR-75-1中,为研究PTEN在肿瘤发生发展中的作用奠定了基础.
採用分子剋隆技術構建重組質粒人野生型PTEN綠色熒光蛋白真覈錶達載體(pEGFP-C1-PTEN),以脂質體轉染法轉染人乳腺癌細胞株ZR-75-1中,應用RT-PCR、Western印跡法分析目的 基因的錶達.雙酶切和特異PCR結果錶明剋隆的基因片段約1.2 kb,測序法進一步證實該基因為PTEN編碼基因,經NCBIBLAST分析與Gene Bank中基因序列完全相同;RT-PCR、Western印跡顯示pEGFP-C1-PTEN轉染組有PTENmRNA及PTEN蛋白錶達.成功構建瞭人野生型PTEN綠色熒光蛋白真覈錶達載體pEGFP-C1-PTEN,併將其成功轉染入乳腺癌細胞ZR-75-1中,為研究PTEN在腫瘤髮生髮展中的作用奠定瞭基礎.
채용분자극륭기술구건중조질립인야생형PTEN록색형광단백진핵표체재체(pEGFP-C1-PTEN),이지질체전염법전염인유선암세포주ZR-75-1중,응용RT-PCR、Western인적법분석목적 기인적표체.쌍매절화특이PCR결과표명극륭적기인편단약1.2 kb,측서법진일보증실해기인위PTEN편마기인,경NCBIBLAST분석여Gene Bank중기인서렬완전상동;RT-PCR、Western인적현시pEGFP-C1-PTEN전염조유PTENmRNA급PTEN단백표체.성공구건료인야생형PTEN록색형광단백진핵표체재체pEGFP-C1-PTEN,병장기성공전염입유선암세포ZR-75-1중,위연구PTEN재종류발생발전중적작용전정료기출.
