广东医学
廣東醫學
엄동의학
GUNAGDONG MEDICAL JOURNAL
2008年
8期
1270-1272
,共3页
绿脓杆菌外毒素A%基因克隆
綠膿桿菌外毒素A%基因剋隆
록농간균외독소A%기인극륭
目的 对绿脓杆菌外毒素A(pseudomonas aeruginosa exotoxin A,PEA)的常用肽编码基因进行克隆,为后续的基因改良奠定物质基础.方法 以绿脓杆菌基因组DNA为模板,以PEA编码基因特异区段为引物,克隆绿脓杆菌外毒素A常用肽编码基因,经菌落PCR筛选出阳性克隆后再进行DNA测序分析.结果 PCR产物克隆后,菌落PCR挑选得到了3个有意义的阳性克隆,DNA测序结果与GenBank中登录的序列之间一致性达99%.结论 成功获得3个阳性克隆;选择适当的退火温度,采用Touchdown PCR,能保证顺利扩增出目的 基因及保证扩增的特异性.
目的 對綠膿桿菌外毒素A(pseudomonas aeruginosa exotoxin A,PEA)的常用肽編碼基因進行剋隆,為後續的基因改良奠定物質基礎.方法 以綠膿桿菌基因組DNA為模闆,以PEA編碼基因特異區段為引物,剋隆綠膿桿菌外毒素A常用肽編碼基因,經菌落PCR篩選齣暘性剋隆後再進行DNA測序分析.結果 PCR產物剋隆後,菌落PCR挑選得到瞭3箇有意義的暘性剋隆,DNA測序結果與GenBank中登錄的序列之間一緻性達99%.結論 成功穫得3箇暘性剋隆;選擇適噹的退火溫度,採用Touchdown PCR,能保證順利擴增齣目的 基因及保證擴增的特異性.
목적 대록농간균외독소A(pseudomonas aeruginosa exotoxin A,PEA)적상용태편마기인진행극륭,위후속적기인개량전정물질기출.방법 이록농간균기인조DNA위모판,이PEA편마기인특이구단위인물,극륭록농간균외독소A상용태편마기인,경균락PCR사선출양성극륭후재진행DNA측서분석.결과 PCR산물극륭후,균락PCR도선득도료3개유의의적양성극륭,DNA측서결과여GenBank중등록적서렬지간일치성체99%.결론 성공획득3개양성극륭;선택괄당적퇴화온도,채용Touchdown PCR,능보증순리확증출목적 기인급보증확증적특이성.
