麦类作物学报
麥類作物學報
맥류작물학보
JOURNAL OF TRITICEAE CROPS
2009年
2期
199-205
,共7页
转基因小麦%PCR%实时荧光PCR%绝对检测低限%相对检测低限
轉基因小麥%PCR%實時熒光PCR%絕對檢測低限%相對檢測低限
전기인소맥%PCR%실시형광PCR%절대검측저한%상대검측저한
为了确定小麦转基因成分PCR和实时荧光PCR方法的定性检测低限,将转基因小麦B73与非转基因小麦(检测外源基因)、小麦与大米(检测内源基因)分剐进行质量分数配比后提取DNA用于测定相对检测低限,再将100%转基因小麦B73的DNA进行浓度稀释用于测定绝对检测低限,并应用已知的NOS、bar、ubiquitin,ui-dA(GUS)外源基因和肌Wx012、GAG56D内源基因的引物和探针时模板DNA分别进行PCR与实时荧光PCR扩增.结果表明,最终确定PCR方法检测小麦转基因成分的相对检测低限为0.1%(质量分数),绝对检测低限为0.5 ng/ⅡL;实时荧光PCR方法的相对检测低限为0.1%(质量分数),绝对检测低限为0.01 ng/μL.所确定的检测低限可满足国家对转基因产品的最低标识要求.
為瞭確定小麥轉基因成分PCR和實時熒光PCR方法的定性檢測低限,將轉基因小麥B73與非轉基因小麥(檢測外源基因)、小麥與大米(檢測內源基因)分剮進行質量分數配比後提取DNA用于測定相對檢測低限,再將100%轉基因小麥B73的DNA進行濃度稀釋用于測定絕對檢測低限,併應用已知的NOS、bar、ubiquitin,ui-dA(GUS)外源基因和肌Wx012、GAG56D內源基因的引物和探針時模闆DNA分彆進行PCR與實時熒光PCR擴增.結果錶明,最終確定PCR方法檢測小麥轉基因成分的相對檢測低限為0.1%(質量分數),絕對檢測低限為0.5 ng/ⅡL;實時熒光PCR方法的相對檢測低限為0.1%(質量分數),絕對檢測低限為0.01 ng/μL.所確定的檢測低限可滿足國傢對轉基因產品的最低標識要求.
위료학정소맥전기인성분PCR화실시형광PCR방법적정성검측저한,장전기인소맥B73여비전기인소맥(검측외원기인)、소맥여대미(검측내원기인)분과진행질량분수배비후제취DNA용우측정상대검측저한,재장100%전기인소맥B73적DNA진행농도희석용우측정절대검측저한,병응용이지적NOS、bar、ubiquitin,ui-dA(GUS)외원기인화기Wx012、GAG56D내원기인적인물화탐침시모판DNA분별진행PCR여실시형광PCR확증.결과표명,최종학정PCR방법검측소맥전기인성분적상대검측저한위0.1%(질량분수),절대검측저한위0.5 ng/ⅡL;실시형광PCR방법적상대검측저한위0.1%(질량분수),절대검측저한위0.01 ng/μL.소학정적검측저한가만족국가대전기인산품적최저표식요구.
