CAJ | 학술논문

背景:虽然聚合酶链反应方法具有特异性强、灵敏度高、操作简单、快速的特点,但同时也发现用聚合酶链反应技术进行生物化学实验和医学检验时,经常会出现假阴性的现象.目的:探讨聚合酶链反应变性温度与产物假阴性关系.设计、时间及地点:观察实验,于2008-03在占林大学第二医院中心实验室完成.材料:重组质粒pUC-19(含有HBV完整基因组)和人肠杆菌JM109由吉林人学第二医院中心实验室提供.质粒DNA小量抽提试剂盒购自爱思进AXYGEN生物技术(杭州)公司.方法:以含有HBV完整基因组的蕈组质粒pUC-19为模板进行聚合酶链反应扩增,人为改变聚合酶链反应循环变性温度,观察其对聚合酶链反应扩增结果的影响.主要观察指标:以不加模板的反应体系为阴性对照,以加2倍于正常反应体系的模板反应体系为阳性对照,肉眼在紫外灯下观察小到产物判为阴性.结果:随着变件温度的降低,聚合酶链反应扩增效率降低,产物量明显减少.当变性温度低至85℃及85℃以下,琼脂糖凝胶电泳肉眼观察小到扩增产物.结论:较低的变性温度可导致扩增效率降低甚至假阴性的结果.
배경:수연취합매련반응방법구유특이성강、령민도고、조작간단、쾌속적특점,단동시야발현용취합매련반응기술진행생물화학실험화의학검험시,경상회출현가음성적현상.목적:탐토취합매련반응변성온도여산물가음성관계.설계、시간급지점:관찰실험,우2008-03재점림대학제이의원중심실험실완성.재료:중조질립pUC-19(함유HBV완정기인조)화인장간균JM109유길림인학제이의원중심실험실제공.질립DNA소량추제시제합구자애사진AXYGEN생물기술(항주)공사.방법:이함유HBV완정기인조적심조질립pUC-19위모판진행취합매련반응확증,인위개변취합매련반응순배변성온도,관찰기대취합매련반응확증결과적영향.주요관찰지표:이불가모판적반응체계위음성대조,이가2배우정상반응체계적모판반응체계위양성대조,육안재자외등하관찰소도산물판위음성.결과:수착변건온도적강저,취합매련반응확증효솔강저,산물량명현감소.당변성온도저지85℃급85℃이하,경지당응효전영육안관찰소도확증산물.결론:교저적변성온도가도치확증효솔강저심지가음성적결과.