中国血吸虫病防治杂志
中國血吸蟲病防治雜誌
중국혈흡충병방치잡지
CHINESE JOURNAL OF SCHISTOSOMIASIS CONTROL
2010年
5期
442-445,封3
,共5页
日本血吸虫%重组信号蛋白14-3-3疫苗%虫卵肉芽肿%肝纤维化%小鼠
日本血吸蟲%重組信號蛋白14-3-3疫苗%蟲卵肉芽腫%肝纖維化%小鼠
일본혈흡충%중조신호단백14-3-3역묘%충란육아종%간섬유화%소서
目的 探讨日本血吸虫重组信号蛋白(rSj14-3-3)疫苗对小鼠的抗病免疫效应.方法 将含有Sj14-3-3编码基因的E.coil BL21/pET28a涂布于LB/卡那霉素/IPTG/X-gal平板,培养、收集细菌,超声碎菌,分离、纯化,分别取5μl用SDS-PAGE法观察纯化结果,并采用BCA法测定重组蛋白的浓度.45只BALB/c小鼠随机分为3组:A组(感染对照组)于第0周每鼠经背部皮下多点注射50 μl PBS及等体积完全弗氏佐剂(CFA),第2、4周每鼠皮下多点加强注射50 μl PBS加等体积不完全弗氏佐剂(IFA).B组(rSj14-3-3组)免疫方法同A组,仅将PBS改为50μg(50μl)eSj14-3-3.上述两组分别于末次免疫2周后每鼠经腹部皮肤感染日本血吸虫尾蚴(30±2)条.C组(正常对照组)未作任何处理.攻击感染45 d后剖杀小鼠,测量肝脏单个虫卵肉芽肿面积大小,并测定血清透明质酸及层黏连蛋白含量.结果 rSj14-3-3疫苗组小鼠虫卵肉芽肿直径为(208.5±26.3)μm,显著小于感染对照组的(267.7±28.6)μm(P＜0.01).eSj14-3-3疫苗组透明质酸和层黏连蛋白水平显著低于感染对照组(P＜0.01),但两者均高于正常对照组.结论 rSj14-3-3疫苗具有一定的抗虫卵肉芽肿及抗肝纤维化作用.
目的 探討日本血吸蟲重組信號蛋白(rSj14-3-3)疫苗對小鼠的抗病免疫效應.方法 將含有Sj14-3-3編碼基因的E.coil BL21/pET28a塗佈于LB/卡那黴素/IPTG/X-gal平闆,培養、收集細菌,超聲碎菌,分離、純化,分彆取5μl用SDS-PAGE法觀察純化結果,併採用BCA法測定重組蛋白的濃度.45隻BALB/c小鼠隨機分為3組:A組(感染對照組)于第0週每鼠經揹部皮下多點註射50 μl PBS及等體積完全弗氏佐劑(CFA),第2、4週每鼠皮下多點加彊註射50 μl PBS加等體積不完全弗氏佐劑(IFA).B組(rSj14-3-3組)免疫方法同A組,僅將PBS改為50μg(50μl)eSj14-3-3.上述兩組分彆于末次免疫2週後每鼠經腹部皮膚感染日本血吸蟲尾蚴(30±2)條.C組(正常對照組)未作任何處理.攻擊感染45 d後剖殺小鼠,測量肝髒單箇蟲卵肉芽腫麵積大小,併測定血清透明質痠及層黏連蛋白含量.結果 rSj14-3-3疫苗組小鼠蟲卵肉芽腫直徑為(208.5±26.3)μm,顯著小于感染對照組的(267.7±28.6)μm(P＜0.01).eSj14-3-3疫苗組透明質痠和層黏連蛋白水平顯著低于感染對照組(P＜0.01),但兩者均高于正常對照組.結論 rSj14-3-3疫苗具有一定的抗蟲卵肉芽腫及抗肝纖維化作用.
목적 탐토일본혈흡충중조신호단백(rSj14-3-3)역묘대소서적항병면역효응.방법 장함유Sj14-3-3편마기인적E.coil BL21/pET28a도포우LB/잡나매소/IPTG/X-gal평판,배양、수집세균,초성쇄균,분리、순화,분별취5μl용SDS-PAGE법관찰순화결과,병채용BCA법측정중조단백적농도.45지BALB/c소서수궤분위3조:A조(감염대조조)우제0주매서경배부피하다점주사50 μl PBS급등체적완전불씨좌제(CFA),제2、4주매서피하다점가강주사50 μl PBS가등체적불완전불씨좌제(IFA).B조(rSj14-3-3조)면역방법동A조,부장PBS개위50μg(50μl)eSj14-3-3.상술량조분별우말차면역2주후매서경복부피부감염일본혈흡충미유(30±2)조.C조(정상대조조)미작임하처리.공격감염45 d후부살소서,측량간장단개충란육아종면적대소,병측정혈청투명질산급층점련단백함량.결과 rSj14-3-3역묘조소서충란육아종직경위(208.5±26.3)μm,현저소우감염대조조적(267.7±28.6)μm(P＜0.01).eSj14-3-3역묘조투명질산화층점련단백수평현저저우감염대조조(P＜0.01),단량자균고우정상대조조.결론 rSj14-3-3역묘구유일정적항충란육아종급항간섬유화작용.
