军事医学
軍事醫學
군사의학
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2011年
4期
268-271
,共4页
孙卫国%刘农乐%王芳%丁红梅%李邦印%李少华%邵宁生
孫衛國%劉農樂%王芳%丁紅梅%李邦印%李少華%邵寧生
손위국%류농악%왕방%정홍매%리방인%리소화%소저생
成纤维细胞生长因子10%蛋白稳定性%突变体%基因表达
成纖維細胞生長因子10%蛋白穩定性%突變體%基因錶達
성섬유세포생장인자10%단백은정성%돌변체%기인표체
目的 原核系统可溶性地表达一种热稳定性的人角质细胞生长因子-2(human keratinocyte growth factor2,hKGF-2)并鉴定其生物活性.方法 通过重叠PCR方法进行定点突变,从人胎肝cDNA文库中获得编码人KGF-2突变体的核酸序列并克隆至原核表达载体pBV220进行诱导、表达和纯化.分别检测重组KGF-2及其突变体重组蛋白的生物活性和室温条件下的稳定性.结果 KGF-2及其突变体具有相同的促Hep-2细胞的增殖能力.室温状态下48 h内,rhKGF-2出现明显降解现象而rhKGF-2突变体几乎没有出现降解,表现出强的热稳定性.结论 KGF-2突变体具有天然KGF-2的生物活性,但其热稳定性明显优于天然KGF-2蛋白,为进一步研究KGF-2的结构和功能奠定了一定的基础.
目的 原覈繫統可溶性地錶達一種熱穩定性的人角質細胞生長因子-2(human keratinocyte growth factor2,hKGF-2)併鑒定其生物活性.方法 通過重疊PCR方法進行定點突變,從人胎肝cDNA文庫中穫得編碼人KGF-2突變體的覈痠序列併剋隆至原覈錶達載體pBV220進行誘導、錶達和純化.分彆檢測重組KGF-2及其突變體重組蛋白的生物活性和室溫條件下的穩定性.結果 KGF-2及其突變體具有相同的促Hep-2細胞的增殖能力.室溫狀態下48 h內,rhKGF-2齣現明顯降解現象而rhKGF-2突變體幾乎沒有齣現降解,錶現齣彊的熱穩定性.結論 KGF-2突變體具有天然KGF-2的生物活性,但其熱穩定性明顯優于天然KGF-2蛋白,為進一步研究KGF-2的結構和功能奠定瞭一定的基礎.
목적 원핵계통가용성지표체일충열은정성적인각질세포생장인자-2(human keratinocyte growth factor2,hKGF-2)병감정기생물활성.방법 통과중첩PCR방법진행정점돌변,종인태간cDNA문고중획득편마인KGF-2돌변체적핵산서렬병극륭지원핵표체재체pBV220진행유도、표체화순화.분별검측중조KGF-2급기돌변체중조단백적생물활성화실온조건하적은정성.결과 KGF-2급기돌변체구유상동적촉Hep-2세포적증식능력.실온상태하48 h내,rhKGF-2출현명현강해현상이rhKGF-2돌변체궤호몰유출현강해,표현출강적열은정성.결론 KGF-2돌변체구유천연KGF-2적생물활성,단기열은정성명현우우천연KGF-2단백,위진일보연구KGF-2적결구화공능전정료일정적기출.
