实用儿科临床杂志
實用兒科臨床雜誌
실용인과림상잡지
Journal of Applied Clinical Pediatrics
2012年
15期
1177-1180
,共4页
范文文%贾秀红%李建厂%唐慎华%朱淑霞
範文文%賈秀紅%李建廠%唐慎華%硃淑霞
범문문%가수홍%리건엄%당신화%주숙하
RNA干扰%阿糖胞苷%同源盒A10基因%K562细胞%白血病
RNA榦擾%阿糖胞苷%同源盒A10基因%K562細胞%白血病
RNA간우%아당포감%동원합A10기인%K562세포%백혈병
目的 探讨利用RNA干扰(RNAi)技术沉默同源盒(HOX) A10基因联合小剂量阿糖胞苷(Ara-C)对K562细胞增殖、凋亡的影响,为白血病的基因治疗提供实验依据.方法 设计合成针对HOXA10的特异性短发卡RNA寡核苷酸链,构建pGPHI/GFP/Neo - HOXA10真核表达载体并测序,应用阳离子脂质体转染K562细胞.RNAi与小剂量Ara-C单独和联合应用后,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡率.结果 成功构建pGPHI/GFP/Neo - HOXA10载体,并转染K562细胞,结果显示该载体能有效降低HOXA10 mRNA表达水平,HOXA10/β-actin灰度比值(ODR)为(38.86 ±4.49)％；RNAi联合小剂量Ara-C作用于K562细胞后,细胞增殖能力明显下降,细胞增殖抑制率(IR)为(75.58 ±8.11)％,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05)；荧光显微镜可见红色荧光凋亡细胞明显增加,凋亡率显著升高,可达(29.71±1.24)％,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 靶向HOXA10的RNAi技术联合小剂量Ara-C能有效抑制K562细胞增殖,并诱导其凋亡,有望成为白血病基因治疗的新方案.
目的 探討利用RNA榦擾(RNAi)技術沉默同源盒(HOX) A10基因聯閤小劑量阿糖胞苷(Ara-C)對K562細胞增殖、凋亡的影響,為白血病的基因治療提供實驗依據.方法 設計閤成針對HOXA10的特異性短髮卡RNA寡覈苷痠鏈,構建pGPHI/GFP/Neo - HOXA10真覈錶達載體併測序,應用暘離子脂質體轉染K562細胞.RNAi與小劑量Ara-C單獨和聯閤應用後,應用四甲基偶氮唑藍(MTT)法檢測細胞增殖能力,流式細胞術檢測細胞凋亡率.結果 成功構建pGPHI/GFP/Neo - HOXA10載體,併轉染K562細胞,結果顯示該載體能有效降低HOXA10 mRNA錶達水平,HOXA10/β-actin灰度比值(ODR)為(38.86 ±4.49)％；RNAi聯閤小劑量Ara-C作用于K562細胞後,細胞增殖能力明顯下降,細胞增殖抑製率(IR)為(75.58 ±8.11)％,與對照組比較差異有統計學意義(P＜0.05)；熒光顯微鏡可見紅色熒光凋亡細胞明顯增加,凋亡率顯著升高,可達(29.71±1.24)％,與對照組比較差異有統計學意義(P＜0.05).結論 靶嚮HOXA10的RNAi技術聯閤小劑量Ara-C能有效抑製K562細胞增殖,併誘導其凋亡,有望成為白血病基因治療的新方案.
목적 탐토이용RNA간우(RNAi)기술침묵동원합(HOX) A10기인연합소제량아당포감(Ara-C)대K562세포증식、조망적영향,위백혈병적기인치료제공실험의거.방법 설계합성침대HOXA10적특이성단발잡RNA과핵감산련,구건pGPHI/GFP/Neo - HOXA10진핵표체재체병측서,응용양리자지질체전염K562세포.RNAi여소제량Ara-C단독화연합응용후,응용사갑기우담서람(MTT)법검측세포증식능력,류식세포술검측세포조망솔.결과 성공구건pGPHI/GFP/Neo - HOXA10재체,병전염K562세포,결과현시해재체능유효강저HOXA10 mRNA표체수평,HOXA10/β-actin회도비치(ODR)위(38.86 ±4.49)％；RNAi연합소제량Ara-C작용우K562세포후,세포증식능력명현하강,세포증식억제솔(IR)위(75.58 ±8.11)％,여대조조비교차이유통계학의의(P＜0.05)；형광현미경가견홍색형광조망세포명현증가,조망솔현저승고,가체(29.71±1.24)％,여대조조비교차이유통계학의의(P＜0.05).결론 파향HOXA10적RNAi기술연합소제량Ara-C능유효억제K562세포증식,병유도기조망,유망성위백혈병기인치료적신방안.
