生理学报
生理學報
생이학보
ACTA PHYSIOLOGICA SINICA
2005年
3期
319-327
,共9页
褪黑素%催乳素瘤%增强子%突变
褪黑素%催乳素瘤%增彊子%突變
퇴흑소%최유소류%증강자%돌변
本工作旨在探讨褪黑素(melatonin,MLT)抑制17-β-雌二醇(17-β-estradiol,E2)诱发的Sprague-Dawley大鼠垂体催乳素(prolactin,PRL)瘤增生的分子机制.结果表明,每只大鼠每日定时皮下注射一定剂量的MLT(0.25、0.50 mg)能显著抑制E2诱发的大鼠垂体PRL瘤的增生;偏低(0.05 mg)或过高剂量(1.00、2.00 mg)的MLT也抑制PRL瘤的增生,但无统计学意义.采用PCR和DNA直接测序显示,与正常垂体对照组比较,PRL瘤中PRL基因增强子出现五处突变,-1885 bp位点由C突变为G,-1 857～-1 855由ACA替换为G,-1792～-1791插入G,-1 383～-1 382插入GGTGTGTG片段,-1265～-1250缺失GTGTGTGTGTGTGTGT片段.0.25 mg/d MLT处理组,PRL瘤中的PRL基因增强子上述个别突变部位仍然存在(-1 885由C突变为G),突变消失(-1792～-1791无插入G),大部分表现为突变减弱(-1856～-1 855缺失AC,-1385～-1384缺失TG,-1250～-1253缺失GTGT).采用荧光素酶报告基因检测PRL基因增强子活性显示,正常垂体、PRL瘤和0.25 mg/d MLT处理的PRL瘤三组中,PRL基因增强子的活性分别为(13448.17±3012.74)、(161831.67±60996.01)和(10212.17±2634.71)OD单位.PRL瘤组增强子活性较正常垂体升高11倍(P＜0.001),MLT处理组增强子活性较PRL瘤组降低93.69%(P＜0.001).上述三组PRL基因增强子空间结构的分析表明,PRL基因增强子DNA的曲折程度为PRL瘤组＞MLT处理组＞正常垂体.以上结果证实,MLT抑制大鼠垂体PRL瘤增生的重要分子机制之一可能是减弱PRL基因增强子的突变,也提示MLT可减弱PRL基因增强子的突变,从而下调PRL基因的高表达,可能与降低DNA的曲折程度有关.
本工作旨在探討褪黑素(melatonin,MLT)抑製17-β-雌二醇(17-β-estradiol,E2)誘髮的Sprague-Dawley大鼠垂體催乳素(prolactin,PRL)瘤增生的分子機製.結果錶明,每隻大鼠每日定時皮下註射一定劑量的MLT(0.25、0.50 mg)能顯著抑製E2誘髮的大鼠垂體PRL瘤的增生;偏低(0.05 mg)或過高劑量(1.00、2.00 mg)的MLT也抑製PRL瘤的增生,但無統計學意義.採用PCR和DNA直接測序顯示,與正常垂體對照組比較,PRL瘤中PRL基因增彊子齣現五處突變,-1885 bp位點由C突變為G,-1 857～-1 855由ACA替換為G,-1792～-1791插入G,-1 383～-1 382插入GGTGTGTG片段,-1265～-1250缺失GTGTGTGTGTGTGTGT片段.0.25 mg/d MLT處理組,PRL瘤中的PRL基因增彊子上述箇彆突變部位仍然存在(-1 885由C突變為G),突變消失(-1792～-1791無插入G),大部分錶現為突變減弱(-1856～-1 855缺失AC,-1385～-1384缺失TG,-1250～-1253缺失GTGT).採用熒光素酶報告基因檢測PRL基因增彊子活性顯示,正常垂體、PRL瘤和0.25 mg/d MLT處理的PRL瘤三組中,PRL基因增彊子的活性分彆為(13448.17±3012.74)、(161831.67±60996.01)和(10212.17±2634.71)OD單位.PRL瘤組增彊子活性較正常垂體升高11倍(P＜0.001),MLT處理組增彊子活性較PRL瘤組降低93.69%(P＜0.001).上述三組PRL基因增彊子空間結構的分析錶明,PRL基因增彊子DNA的麯摺程度為PRL瘤組＞MLT處理組＞正常垂體.以上結果證實,MLT抑製大鼠垂體PRL瘤增生的重要分子機製之一可能是減弱PRL基因增彊子的突變,也提示MLT可減弱PRL基因增彊子的突變,從而下調PRL基因的高錶達,可能與降低DNA的麯摺程度有關.
본공작지재탐토퇴흑소(melatonin,MLT)억제17-β-자이순(17-β-estradiol,E2)유발적Sprague-Dawley대서수체최유소(prolactin,PRL)류증생적분자궤제.결과표명,매지대서매일정시피하주사일정제량적MLT(0.25、0.50 mg)능현저억제E2유발적대서수체PRL류적증생;편저(0.05 mg)혹과고제량(1.00、2.00 mg)적MLT야억제PRL류적증생,단무통계학의의.채용PCR화DNA직접측서현시,여정상수체대조조비교,PRL류중PRL기인증강자출현오처돌변,-1885 bp위점유C돌변위G,-1 857～-1 855유ACA체환위G,-1792～-1791삽입G,-1 383～-1 382삽입GGTGTGTG편단,-1265～-1250결실GTGTGTGTGTGTGTGT편단.0.25 mg/d MLT처리조,PRL류중적PRL기인증강자상술개별돌변부위잉연존재(-1 885유C돌변위G),돌변소실(-1792～-1791무삽입G),대부분표현위돌변감약(-1856～-1 855결실AC,-1385～-1384결실TG,-1250～-1253결실GTGT).채용형광소매보고기인검측PRL기인증강자활성현시,정상수체、PRL류화0.25 mg/d MLT처리적PRL류삼조중,PRL기인증강자적활성분별위(13448.17±3012.74)、(161831.67±60996.01)화(10212.17±2634.71)OD단위.PRL류조증강자활성교정상수체승고11배(P＜0.001),MLT처리조증강자활성교PRL류조강저93.69%(P＜0.001).상술삼조PRL기인증강자공간결구적분석표명,PRL기인증강자DNA적곡절정도위PRL류조＞MLT처리조＞정상수체.이상결과증실,MLT억제대서수체PRL류증생적중요분자궤제지일가능시감약PRL기인증강자적돌변,야제시MLT가감약PRL기인증강자적돌변,종이하조PRL기인적고표체,가능여강저DNA적곡절정도유관.
