CAJ | 학술논문

为获得保留有抗菌活性而降低溶血活性作用的蜂毒素,对其分子结构进行了改造.其中一条序列缺失Lys-7,另一条缺失Leu-9.用PCR技术获得两条新的蜂毒素基因,将其克隆到酵母表达载体pPICZα-A,获得重组质粒pPICZα-A-Mel 1和pPICZα-A-Mel 2.将2个重组质粒分别转化毕赤酵母菌GS115.筛选获得重组酵母菌对重组酵母菌培养条件进行优化,在YEPD中含甘油2%,pH为7,重组酵母菌培养48 h后,0.5%的甲醇诱导72 h,表达目的蛋白通过Tricion-SDS-PAGE确定分子质量为5.4 kD.杀菌效价分别达0.947、1.085.结果表明两条蜂毒素基因成功的在毕赤酵母中表达,经突变后表达的蜂毒素降低了溶血活性,同时保留了抗菌活性.
위획득보류유항균활성이강저용혈활성작용적봉독소,대기분자결구진행료개조.기중일조서렬결실Lys-7,령일조결실Leu-9.용PCR기술획득량조신적봉독소기인,장기극륭도효모표체재체pPICZα-A,획득중조질립pPICZα-A-Mel 1화pPICZα-A-Mel 2.장2개중조질립분별전화필적효모균GS115.사선획득중조효모균대중조효모균배양조건진행우화,재YEPD중함감유2%,pH위7,중조효모균배양48 h후,0.5%적갑순유도72 h,표체목적단백통과Tricion-SDS-PAGE학정분자질량위5.4 kD.살균효개분별체0.947、1.085.결과표명량조봉독소기인성공적재필적효모중표체,경돌변후표체적봉독소강저료용혈활성,동시보류료항균활성.