北方园艺
北方園藝
북방완예
NORTHERN HORTICULTURE
2008年
5期
197-199
,共3页
王轶%陈崇顺%曹伟杰%王转梅
王軼%陳崇順%曹偉傑%王轉梅
왕질%진숭순%조위걸%왕전매
洋桔梗%RAPD%正交设计
洋桔梗%RAPD%正交設計
양길경%RAPD%정교설계
利用正交设计法对影响洋桔梗RAPD反应的Mg2+、dNTPs、Taq DNA 聚合酶、引物和模板等主要因素的作用进行了比较分析,建立了洋桔梗RAPD的最佳反应体系:即在25 μL反应体积中,10×PCR buffer为2.5 μL ,Mg2+浓度为2.0 mmol/L,dNTPs浓度为0.4 mmol/L,引物浓度为0.2 μmol/L,模板浓度为50 ng/μL,Taq DNA聚合酶用量为1.0 U;在此基础上,比较了不同退火温度对RAPD扩增产物的影响,退火温度经筛选选定为41℃;最后再将该反应体系应用于不同引物,结果表明该优化结果具有较好的稳定性和通用性.
利用正交設計法對影響洋桔梗RAPD反應的Mg2+、dNTPs、Taq DNA 聚閤酶、引物和模闆等主要因素的作用進行瞭比較分析,建立瞭洋桔梗RAPD的最佳反應體繫:即在25 μL反應體積中,10×PCR buffer為2.5 μL ,Mg2+濃度為2.0 mmol/L,dNTPs濃度為0.4 mmol/L,引物濃度為0.2 μmol/L,模闆濃度為50 ng/μL,Taq DNA聚閤酶用量為1.0 U;在此基礎上,比較瞭不同退火溫度對RAPD擴增產物的影響,退火溫度經篩選選定為41℃;最後再將該反應體繫應用于不同引物,結果錶明該優化結果具有較好的穩定性和通用性.
이용정교설계법대영향양길경RAPD반응적Mg2+、dNTPs、Taq DNA 취합매、인물화모판등주요인소적작용진행료비교분석,건립료양길경RAPD적최가반응체계:즉재25 μL반응체적중,10×PCR buffer위2.5 μL ,Mg2+농도위2.0 mmol/L,dNTPs농도위0.4 mmol/L,인물농도위0.2 μmol/L,모판농도위50 ng/μL,Taq DNA취합매용량위1.0 U;재차기출상,비교료불동퇴화온도대RAPD확증산물적영향,퇴화온도경사선선정위41℃;최후재장해반응체계응용우불동인물,결과표명해우화결과구유교호적은정성화통용성.
