南京医科大学学报(自然科学版)
南京醫科大學學報(自然科學版)
남경의과대학학보(자연과학판)
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINALIS NANJING
2008年
5期
601-604
,共4页
郭英杰%张奇军%钱玲梅%孔祥清%曹克将
郭英傑%張奇軍%錢玲梅%孔祥清%曹剋將
곽영걸%장기군%전령매%공상청%조극장
FHL1基因%P19细胞%细胞分化
FHL1基因%P19細胞%細胞分化
FHL1기인%P19세포%세포분화
目的:观察FHL1(Four and a half LIM domains protein 1)基因在P19细胞向心肌细胞诱导分化过程中表达水平的变化,探讨FHL1基因与心肌细胞分化之间的关系.方法:P19细胞经1%二甲基亚砜(DMSO)诱导悬浮培养4天形成细胞聚集体,将聚集体用生长培养基黏附培养至14天,观察细胞跳动情况,用肌钙蛋白I(cTnI)抗体行Western Blot以鉴定心肌细胞分化,并采用RT-PCR、Western Blot技术在细胞分化成熟的不同时段检测P19细胞中 FHL1 基因mRNA和蛋白的表达水平.结果:DMSO 诱导4天后,用生长培养基黏附培养至第8天,P19细胞出现自发性节律跳动的细胞团片,Western Blot检测cTnI蛋白呈阳性.FHL1基因在P19细胞向心肌细胞分化过程中,随细胞分化成熟该基因表达水平逐渐上调,Western Blot检测结果与RT-PCR检测结果基本一致.FHL1基因在分化第0~8天表达显著增高,各时间点之间差异显著(P<0.05);第8~14天表达趋于稳定,各时间点之间差异无显著性(P>0.05).结论:FHL1基因在P19细胞向心肌细胞分化过程中表达逐渐上调,可能参与心肌细胞的分化和发育.
目的:觀察FHL1(Four and a half LIM domains protein 1)基因在P19細胞嚮心肌細胞誘導分化過程中錶達水平的變化,探討FHL1基因與心肌細胞分化之間的關繫.方法:P19細胞經1%二甲基亞砜(DMSO)誘導懸浮培養4天形成細胞聚集體,將聚集體用生長培養基黏附培養至14天,觀察細胞跳動情況,用肌鈣蛋白I(cTnI)抗體行Western Blot以鑒定心肌細胞分化,併採用RT-PCR、Western Blot技術在細胞分化成熟的不同時段檢測P19細胞中 FHL1 基因mRNA和蛋白的錶達水平.結果:DMSO 誘導4天後,用生長培養基黏附培養至第8天,P19細胞齣現自髮性節律跳動的細胞糰片,Western Blot檢測cTnI蛋白呈暘性.FHL1基因在P19細胞嚮心肌細胞分化過程中,隨細胞分化成熟該基因錶達水平逐漸上調,Western Blot檢測結果與RT-PCR檢測結果基本一緻.FHL1基因在分化第0~8天錶達顯著增高,各時間點之間差異顯著(P<0.05);第8~14天錶達趨于穩定,各時間點之間差異無顯著性(P>0.05).結論:FHL1基因在P19細胞嚮心肌細胞分化過程中錶達逐漸上調,可能參與心肌細胞的分化和髮育.
목적:관찰FHL1(Four and a half LIM domains protein 1)기인재P19세포향심기세포유도분화과정중표체수평적변화,탐토FHL1기인여심기세포분화지간적관계.방법:P19세포경1%이갑기아풍(DMSO)유도현부배양4천형성세포취집체,장취집체용생장배양기점부배양지14천,관찰세포도동정황,용기개단백I(cTnI)항체행Western Blot이감정심기세포분화,병채용RT-PCR、Western Blot기술재세포분화성숙적불동시단검측P19세포중 FHL1 기인mRNA화단백적표체수평.결과:DMSO 유도4천후,용생장배양기점부배양지제8천,P19세포출현자발성절률도동적세포단편,Western Blot검측cTnI단백정양성.FHL1기인재P19세포향심기세포분화과정중,수세포분화성숙해기인표체수평축점상조,Western Blot검측결과여RT-PCR검측결과기본일치.FHL1기인재분화제0~8천표체현저증고,각시간점지간차이현저(P<0.05);제8~14천표체추우은정,각시간점지간차이무현저성(P>0.05).결론:FHL1기인재P19세포향심기세포분화과정중표체축점상조,가능삼여심기세포적분화화발육.