CAJ | 학술논문

很多关于干旱胁迫机制的研究涉及目标基因的差异表达,实时定量PCR技术在探测目标mRNA的变化方面是最为敏感的.为了避免偏差,目标基因的表达常常需要参照一个或多个内标基因进行定量,内标基因一般是在不同的处理条件下表达相对稳定的管家基因,目前使用最多的是actin基因家族,但在不同处理条件下许多actin同源基因表达的相对稳定性并没有经过确认.很多研究表明:使用不合适的管家基因定量目标基因的表达,将对实验结果造成严重偏差,为了阐明该问题和选择最合适的参照基因,检测了在干旱胁迫条件下8个actin种内同源基因的表达稳定性,通过geNorm软件对其稳定性进行分析,发现在所选择的管家基因当中ACT(X16280)1的表达最稳定,而选择不稳定的actin基因作为内标,会严重影响对目标基因相对表达量的估计.因此,在研究干旱胁迫下目标基因的表达水平时,为了实验结果的准确性和可靠性,建议采用ACT(X16280)1或ACT(X16280)2作为内标.
흔다관우간한협박궤제적연구섭급목표기인적차이표체,실시정량PCR기술재탐측목표mRNA적변화방면시최위민감적.위료피면편차,목표기인적표체상상수요삼조일개혹다개내표기인진행정량,내표기인일반시재불동적처리조건하표체상대은정적관가기인,목전사용최다적시actin기인가족,단재불동처리조건하허다actin동원기인표체적상대은정성병몰유경과학인.흔다연구표명:사용불합괄적관가기인정량목표기인적표체,장대실험결과조성엄중편차,위료천명해문제화선택최합괄적삼조기인,검측료재간한협박조건하8개actin충내동원기인적표체은정성,통과geNorm연건대기은정성진행분석,발현재소선택적관가기인당중ACT(X16280)1적표체최은정,이선택불은정적actin기인작위내표,회엄중영향대목표기인상대표체량적고계.인차,재연구간한협박하목표기인적표체수평시,위료실험결과적준학성화가고성,건의채용ACT(X16280)1혹ACT(X16280)2작위내표.