CAJ | 학술논문

建立转基因成分灵敏、准确的定量标识是实施转基因安全阈值管理的一个基本步骤,其中实时定量PCR技术是检测产品中转基因含量的主要技术方法.本研究利用该技术确定了双价(crylAc+CpTi)转基因抗虫水稻(Oryza sativa)科丰6号中有3个拷贝的外源基因插入.通过对外源基因Bt和转化事件特异的边界特异序列为对象的绝对定量和相对定量检测方法的研究,发现以边界特异序列为对象的事件特异性检测和以目的基因Bt为对象的检测都能够满足相对定量检测的要求.在100 ng基因组DNA中,Bt基因和特异性检测的相对定量检测限分别为0.1％和0.5％,在绝对定量检测中,特异性检测的检测限为5个拷贝.不同检测方法对4个已知转基因含量的样品检测结果与预期均一致.结果表明,以转基因产品占总产品比例为定义的转基因含量的测定中,多拷贝或单拷贝基因为对象的不同定量方法的检测对转基因产品的相对定量结果没有影响,本研究对转基因产品的定量阈值设定具有一定的借鉴意义.
건립전기인성분령민、준학적정량표식시실시전기인안전역치관리적일개기본보취,기중실시정량PCR기술시검측산품중전기인함량적주요기술방법.본연구이용해기술학정료쌍개(crylAc+CpTi)전기인항충수도(Oryza sativa)과봉6호중유3개고패적외원기인삽입.통과대외원기인Bt화전화사건특이적변계특이서렬위대상적절대정량화상대정량검측방법적연구,발현이변계특이서렬위대상적사건특이성검측화이목적기인Bt위대상적검측도능구만족상대정량검측적요구.재100 ng기인조DNA중,Bt기인화특이성검측적상대정량검측한분별위0.1％화0.5％,재절대정량검측중,특이성검측적검측한위5개고패.불동검측방법대4개이지전기인함량적양품검측결과여예기균일치.결과표명,이전기인산품점총산품비례위정의적전기인함량적측정중,다고패혹단고패기인위대상적불동정량방법적검측대전기인산품적상대정량결과몰유영향,본연구대전기인산품적정량역치설정구유일정적차감의의.