中华实验外科杂志
中華實驗外科雜誌
중화실험외과잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL SURGERY
2008年
2期
155-157,插1
,共4页
尚丹%郑启昌%宋自芳%舒晓刚%汪谢丹%郭兴军
尚丹%鄭啟昌%宋自芳%舒曉剛%汪謝丹%郭興軍
상단%정계창%송자방%서효강%왕사단%곽흥군
血管平滑肌细胞%细胞增殖%基因表达
血管平滑肌細胞%細胞增殖%基因錶達
혈관평활기세포%세포증식%기인표체
目的 真核表达人arresten蛋白,并观察其对血管平滑肌细胞体外增殖的影响.方法 用脂质体介导,将含有人arresten基因的重组质粒pSecTag2-AT转染COS-7细胞;应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染细胞目的 基因mRNA表达;收集浓缩转染48 h细胞上清液,Western blot检测目的 蛋白的表达.离体培养大鼠血管平滑肌细胞,用CCK-8法检测转染细胞上清液对平滑肌细胞体外增殖的影响.结果 重组质粒pSecTag2-AT转染的COS-7细胞有目的 基因mRNA的表达;转染细胞上清液中有arresten蛋白的表达.细胞体外增殖分析显示转染细胞上清液可显著抑制血管平滑肌细胞的体外增殖(F=40.154,P＜0.01).结论 真核表达的人arresten蛋白能有效抑制血管平滑肌细胞的体外增殖,为日后开展抑制血管新生内膜增生的基因治疗奠定了基础.
目的 真覈錶達人arresten蛋白,併觀察其對血管平滑肌細胞體外增殖的影響.方法 用脂質體介導,將含有人arresten基因的重組質粒pSecTag2-AT轉染COS-7細胞;應用逆轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)檢測轉染細胞目的 基因mRNA錶達;收集濃縮轉染48 h細胞上清液,Western blot檢測目的 蛋白的錶達.離體培養大鼠血管平滑肌細胞,用CCK-8法檢測轉染細胞上清液對平滑肌細胞體外增殖的影響.結果 重組質粒pSecTag2-AT轉染的COS-7細胞有目的 基因mRNA的錶達;轉染細胞上清液中有arresten蛋白的錶達.細胞體外增殖分析顯示轉染細胞上清液可顯著抑製血管平滑肌細胞的體外增殖(F=40.154,P＜0.01).結論 真覈錶達的人arresten蛋白能有效抑製血管平滑肌細胞的體外增殖,為日後開展抑製血管新生內膜增生的基因治療奠定瞭基礎.
목적 진핵표체인arresten단백,병관찰기대혈관평활기세포체외증식적영향.방법 용지질체개도,장함유인arresten기인적중조질립pSecTag2-AT전염COS-7세포;응용역전록-취합매련반응(RT-PCR)검측전염세포목적 기인mRNA표체;수집농축전염48 h세포상청액,Western blot검측목적 단백적표체.리체배양대서혈관평활기세포,용CCK-8법검측전염세포상청액대평활기세포체외증식적영향.결과 중조질립pSecTag2-AT전염적COS-7세포유목적 기인mRNA적표체;전염세포상청액중유arresten단백적표체.세포체외증식분석현시전염세포상청액가현저억제혈관평활기세포적체외증식(F=40.154,P＜0.01).결론 진핵표체적인arresten단백능유효억제혈관평활기세포적체외증식,위일후개전억제혈관신생내막증생적기인치료전정료기출.
