CAJ | 학술논문

目的定量描述整合素α3β1对肝细胞癌(HCC)细胞与Ⅳ型胶原裱衬表面粘附力特性和HCC细胞对Ⅳ型胶原趋化行为的影响.方法采用微吸管实验技术测定HCC细胞与Ⅳ型胶原裱衬表面的粘附力;进一步加入针对整合素α3β1的单克隆抗体(Anti-α3,Anti-β1)处理HCC细胞,观察Anti-α3、Anti-β1对细胞与Ⅳ型胶原裱衬表面的粘附力的影响.采用双微吸管实验法进行HCC细胞趋化实验,在微管内加入600μg/ml的Ⅳ型胶原,并引导微管尖端与同一细胞紧密接触,动态观察细胞伪足形成过程;在微吸管内分别加入Anti-α3、Anti-β1,观察整合素亚单位阻断对HCC细胞伪足形成的影响.利用流式细胞仪对HCC细胞表面整合素α3、β1亚单位的表达进行分析.结果HCC细胞与5μg/mlⅣ型胶原裱衬表面之间的粘附力为932±134(×10-10N,n=60),加入5μ/gml Anti-α3粘附力减小到536±122(×10-10N,n=60);加入10μg/ml Anti-α3时粘附力减小到476±63(×10-10N,n=50).加入5μg/ml Anti-β1粘附力减小到449±119(×10-10N,n=60);加入10μg/mlAnti-β1时粘附力减小到220±78(×10-10N,n=55).双微吸管趋化实验表明:两侧微吸管加入相同浓度Ⅳ型胶原,细胞向两侧微吸管均有伪足形成;在此基础上,微吸管分别加入Anti-α3、Anti-β1的一侧,HCC细胞伪足生长曲线呈现明显的抑制,而未加入抗体的微吸管一侧与加入的对侧相比,该侧细胞的伪足明显增加.流式细胞仪分析表明,所研究细胞整合素α3、β1亚单位表达率达分别为95.55%和95.78%.结论整合素α3β1是联系HCC细胞与Ⅳ型胶原裱衬表面粘附以及HCC细胞对Ⅳ型胶原趋化性伪足形成的重要受体基础.
목적정량묘술정합소α3β1대간세포암(HCC)세포여Ⅳ형효원표츤표면점부력특성화HCC세포대Ⅳ형효원추화행위적영향.방법채용미흡관실험기술측정HCC세포여Ⅳ형효원표츤표면적점부력;진일보가입침대정합소α3β1적단극륭항체(Anti-α3,Anti-β1)처리HCC세포,관찰Anti-α3、Anti-β1대세포여Ⅳ형효원표츤표면적점부력적영향.채용쌍미흡관실험법진행HCC세포추화실험,재미관내가입600μg/ml적Ⅳ형효원,병인도미관첨단여동일세포긴밀접촉,동태관찰세포위족형성과정;재미흡관내분별가입Anti-α3、Anti-β1,관찰정합소아단위조단대HCC세포위족형성적영향.이용류식세포의대HCC세포표면정합소α3、β1아단위적표체진행분석.결과HCC세포여5μg/mlⅣ형효원표츤표면지간적점부력위932±134(×10-10N,n=60),가입5μ/gml Anti-α3점부력감소도536±122(×10-10N,n=60);가입10μg/ml Anti-α3시점부력감소도476±63(×10-10N,n=50).가입5μg/ml Anti-β1점부력감소도449±119(×10-10N,n=60);가입10μg/mlAnti-β1시점부력감소도220±78(×10-10N,n=55).쌍미흡관추화실험표명:량측미흡관가입상동농도Ⅳ형효원,세포향량측미흡관균유위족형성;재차기출상,미흡관분별가입Anti-α3、Anti-β1적일측,HCC세포위족생장곡선정현명현적억제,이미가입항체적미흡관일측여가입적대측상비,해측세포적위족명현증가.류식세포의분석표명,소연구세포정합소α3、β1아단위표체솔체분별위95.55%화95.78%.결론정합소α3β1시련계HCC세포여Ⅳ형효원표츤표면점부이급HCC세포대Ⅳ형효원추화성위족형성적중요수체기출.