中华血液学杂志
中華血液學雜誌
중화혈액학잡지
Chinese Journal of Hematology
2008年
3期
171-174
,共4页
赵益明%董宁征%沈飞%谢丽倩%阮长耿
趙益明%董寧徵%瀋飛%謝麗倩%阮長耿
조익명%동저정%침비%사려천%원장경
von Willebrand因子%胶原%单克隆抗体
von Willebrand因子%膠原%單剋隆抗體
von Willebrand인자%효원%단극륭항체
目的 制备阻断血管性血友病因子(von Willebrand因子)A3区(vWF-A3)与胶原结合的抗vWF-A3单抗,并对其进行生化鉴定和功能研究.方法 用重组vWF-A3蛋白免疫BALB/c小鼠,经标准的方法制备单抗.用ELISA法鉴定单抗特异性,经vWF胶原结合抑制试验筛选获得抑制性单抗,用免疫印迹技术确定单抗与重组(r)vWF-A3和还原性人vWF识别的抗原分子.经胶原结合试验确定单抗对vWF与胶原结合的影响.结果 获得一组共30株抗vWF-A3单抗,其中两株确定为抑制vWF与胶原结合的单抗,分别命名为SZ-123和SZ-125,两株单抗分别与rvWF-A3和vWF强反应,而不与rvWF-A1、A2反应.免疫印迹分析显示SZ-123和SZ-125分别识别相对分子质量为27×103的rvWF-A3、250×103还原性人vWF单体和170×103的vWF酶切片段.单抗SZ-123和SZ-125不仅剂量依赖性地抑制纯化的人血浆vWF与人胎盘和牛皮肤Ⅲ型胶原结合,而且分别抑制人、猕猴或Beagle犬血浆vWF与人胎盘和牛皮肤Ⅲ型胶原结合.结论 抗vWF-A3单抗SZ-123和SZ-125是两株抑制性单抗,有望成为具有治疗潜力的抗血栓药物.
目的 製備阻斷血管性血友病因子(von Willebrand因子)A3區(vWF-A3)與膠原結閤的抗vWF-A3單抗,併對其進行生化鑒定和功能研究.方法 用重組vWF-A3蛋白免疫BALB/c小鼠,經標準的方法製備單抗.用ELISA法鑒定單抗特異性,經vWF膠原結閤抑製試驗篩選穫得抑製性單抗,用免疫印跡技術確定單抗與重組(r)vWF-A3和還原性人vWF識彆的抗原分子.經膠原結閤試驗確定單抗對vWF與膠原結閤的影響.結果 穫得一組共30株抗vWF-A3單抗,其中兩株確定為抑製vWF與膠原結閤的單抗,分彆命名為SZ-123和SZ-125,兩株單抗分彆與rvWF-A3和vWF彊反應,而不與rvWF-A1、A2反應.免疫印跡分析顯示SZ-123和SZ-125分彆識彆相對分子質量為27×103的rvWF-A3、250×103還原性人vWF單體和170×103的vWF酶切片段.單抗SZ-123和SZ-125不僅劑量依賴性地抑製純化的人血漿vWF與人胎盤和牛皮膚Ⅲ型膠原結閤,而且分彆抑製人、獼猴或Beagle犬血漿vWF與人胎盤和牛皮膚Ⅲ型膠原結閤.結論 抗vWF-A3單抗SZ-123和SZ-125是兩株抑製性單抗,有望成為具有治療潛力的抗血栓藥物.
목적 제비조단혈관성혈우병인자(von Willebrand인자)A3구(vWF-A3)여효원결합적항vWF-A3단항,병대기진행생화감정화공능연구.방법 용중조vWF-A3단백면역BALB/c소서,경표준적방법제비단항.용ELISA법감정단항특이성,경vWF효원결합억제시험사선획득억제성단항,용면역인적기술학정단항여중조(r)vWF-A3화환원성인vWF식별적항원분자.경효원결합시험학정단항대vWF여효원결합적영향.결과 획득일조공30주항vWF-A3단항,기중량주학정위억제vWF여효원결합적단항,분별명명위SZ-123화SZ-125,량주단항분별여rvWF-A3화vWF강반응,이불여rvWF-A1、A2반응.면역인적분석현시SZ-123화SZ-125분별식별상대분자질량위27×103적rvWF-A3、250×103환원성인vWF단체화170×103적vWF매절편단.단항SZ-123화SZ-125불부제량의뢰성지억제순화적인혈장vWF여인태반화우피부Ⅲ형효원결합,이차분별억제인、미후혹Beagle견혈장vWF여인태반화우피부Ⅲ형효원결합.결론 항vWF-A3단항SZ-123화SZ-125시량주억제성단항,유망성위구유치료잠력적항혈전약물.