CAJ | 학술논문

目的构建血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达质粒,并观察其表达产物对小型猪深度烫伤创面影响.方法应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术克隆VEGF基因的cDNA序列,并将其正向连接到表达载体pQE-40上,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹方法对其表达产物进行特异性鉴定.猪小面积深Ⅱ度烫伤后,立即将含有1μg/g的VEGF膏剂均匀涂于创面,每个创面200mg膏剂,隔日换药1次,至伤后11d.用透明膜描记称量法记录创面面积,并取创面组织作组织学检测.结果克隆出的VEGF基因cDNA片段由380bp组成,包括翻译起始密码子、编码序列和终止密码子等部分.重组表达质粒pQE-VEGF在M15细菌体内能够表达,VEGF主要存在于细菌包涵体内.小型猪烫伤后7d,VEGF处理的伤口处肉芽组织增生明显,毛细血管数量增多.烫伤11d后,VEGF组的创面可见连续的上皮覆盖,而M15组的创面面积为(0.71±0.23)cm2,伤口仍未愈合,两者差异有非常显著性(P<0.01).结论构建的VEGF表达载体可以编码VEGF121蛋白,其表达产物能够诱导肉芽组织生长,加速新生血管形成,促进创面愈合.
목적구건혈관내피세포생장인자(VEGF)적표체질립,병관찰기표체산물대소형저심도탕상창면영향.방법응용역전록-취합매련식반응(RT-PCR)기술극륭VEGF기인적cDNA서렬,병장기정향련접도표체재체pQE-40상,통과십이완기류산납-취병희선알응효전영(SDS-PAGE)화단백질인적방법대기표체산물진행특이성감정.저소면적심Ⅱ도탕상후,립즉장함유1μg/g적VEGF고제균균도우창면,매개창면200mg고제,격일환약1차,지상후11d.용투명막묘기칭량법기록창면면적,병취창면조직작조직학검측.결과극륭출적VEGF기인cDNA편단유380bp조성,포괄번역기시밀마자、편마서렬화종지밀마자등부분.중조표체질립pQE-VEGF재M15세균체내능구표체,VEGF주요존재우세균포함체내.소형저탕상후7d,VEGF처리적상구처육아조직증생명현,모세혈관수량증다.탕상11d후,VEGF조적창면가견련속적상피복개,이M15조적창면면적위(0.71±0.23)cm2,상구잉미유합,량자차이유비상현저성(P<0.01).결론구건적VEGF표체재체가이편마VEGF121단백,기표체산물능구유도육아조직생장,가속신생혈관형성,촉진창면유합.