CAJ | 학술논문

目的分析16S rRNA基因检测在新生儿脓毒症早期诊断中的临床价值,探讨快速、可靠地诊断该症的试验方法.方法在16S rRNA基因保守区选择一对通用引物,收集临床常见的致病菌株37株,提取细菌DNA并进行PCR检测,采用琼脂糖凝胶电泳法观察扩增结果,同时对该引物的灵敏性及特异性进行检验.对106例临床疑诊为脓毒症的新生儿于入院24 h内,在严格无菌条件下采集血标本,提取DNA进行PCR扩增,同时行血培养、血常规检查及CRP及ESR水平检测,并与同期住院的20例非感染性疾病患儿进行比较.结果 PCR检测细菌DNA均得到预期的约371 bp大小的扩增产物,该引物仅扩增细菌DNA,与病毒及人基因组DNA无交叉反应,其扩增下限为104CFU·L-1的大肠埃希菌.106例疑诊为脓毒症的患儿,血培养阳性15例,PCR检测阳性36例,PCR的阳性检出率显著高于血培养(P<0.005),20例非感染组患儿PCR结果均为阴性.依据新生儿脓毒症诊断标准,PCR的敏感性、特异性及诊断指数分别为82.93%、96.92%和179.85,优于血培养及5项非特异指标至少2项异常的诊断方法.PCR方法6～8 h即能检测出结果,改良核酸提取技术可以将检测时间缩短至4～6 h.结论 PCR方法检测细菌16S rDNA能迅速判断临床标本中是否存在细菌,对于早期诊断新生儿脓毒症具有较高的敏感性及特异性.
목적 분석16S rRNA기인검측재신생인농독증조기진단중적림상개치,탐토쾌속、가고지진단해증적시험방법.방법재16S rRNA기인보수구선택일대통용인물,수집림상상견적치병균주37주,제취세균DNA병진행PCR검측,채용경지당응효전영법관찰확증결과,동시대해인물적령민성급특이성진행검험.대106례림상의진위농독증적신생인우입원24 h내,재엄격무균조건하채집혈표본,제취DNA진행PCR확증,동시행혈배양、혈상규검사급CRP급ESR수평검측,병여동기주원적20례비감염성질병환인진행비교.결과 PCR검측세균DNA균득도예기적약371 bp대소적확증산물,해인물부확증세균DNA,여병독급인기인조DNA무교차반응,기확증하한위104CFU·L-1적대장애희균.106례의진위농독증적환인,혈배양양성15례,PCR검측양성36례,PCR적양성검출솔현저고우혈배양(P<0.005),20례비감염조환인PCR결과균위음성.의거신생인농독증진단표준,PCR적민감성、특이성급진단지수분별위82.93%、96.92%화179.85,우우혈배양급5항비특이지표지소2항이상적진단방법.PCR방법6～8 h즉능검측출결과,개량핵산제취기술가이장검측시간축단지4～6 h.결론 PCR방법검측세균16S rDNA능신속판단림상표본중시부존재세균,대우조기진단신생인농독증구유교고적민감성급특이성.