CAJ | 학술논문

目的研究γ-干扰素(IFN-γ)对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法将IFN-γ以不同浓度(1、10、100、1 000、10 000 U/ml)、不同作用时间(12、24、36、48、60 h)作用于SKOV3细胞,在相差显微镜下观察细胞形态的变化;用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖;用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)半定量法测定细胞VEGF mRNA含量;用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫细胞化学方法测定细胞培养上清液和细胞浆中VEGF蛋白含量.结果 (1)1 000 U/ml IFN-γ作用后SKOV3细胞形态无明显变化.(2)不同浓度(1、10、100、1 000、10 000 U/ml)IFN-γ作用不同时间(12、24、36、48、60 h)后,SKOV3细胞增殖活性比较,差异无显著性(P>0.05).(3)IFN-γ作用后,SKOV3细胞VEGF mRNA和蛋白含量明显减少(P<0.01).IFN-γ浓度达到10 U/ml后起作用[抑制率为(5.2±0.6)%],其后随着浓度的增高,IFN-γ对VEGF mRNA的抑制作用增强,在浓度达到1 000 U/ml 时,抑制作用达到高峰[抑制率为(21.6±2.6)%].但IFN-γ的抑制作用并不存在时间依赖关系,用药24 h后出现抑制作用,并立即达到高峰[抑制率为(22.4±1.7)%],其后抑制作用不随时间的延长而增强.(4)1 000 U/ml IFN-γ作用48 h 后,与对照相比,SKOV3细胞浆中的棕色颗粒明显减少.结论 IFN-γ可以在核酸和蛋白水平下调卵巢癌细胞分泌VEGF.
목적연구γ-간우소(IFN-γ)대인란소암세포주SKOV3세포혈관내피생장인자(VEGF)표체적영향.방법장IFN-γ이불동농도(1、10、100、1 000、10 000 U/ml)、불동작용시간(12、24、36、48、60 h)작용우SKOV3세포,재상차현미경하관찰세포형태적변화;용사갑기우담서람(MTT)비색법측정세포증식;용역전록취합매련반응(RT-PCR)반정량법측정세포VEGF mRNA함량;용쌍항체협심매련면역흡부시험(ELISA)화면역세포화학방법측정세포배양상청액화세포장중VEGF단백함량.결과 (1)1 000 U/ml IFN-γ작용후SKOV3세포형태무명현변화.(2)불동농도(1、10、100、1 000、10 000 U/ml)IFN-γ작용불동시간(12、24、36、48、60 h)후,SKOV3세포증식활성비교,차이무현저성(P>0.05).(3)IFN-γ작용후,SKOV3세포VEGF mRNA화단백함량명현감소(P<0.01).IFN-γ농도체도10 U/ml후기작용[억제솔위(5.2±0.6)%],기후수착농도적증고,IFN-γ대VEGF mRNA적억제작용증강,재농도체도1 000 U/ml 시,억제작용체도고봉[억제솔위(21.6±2.6)%].단IFN-γ적억제작용병불존재시간의뢰관계,용약24 h후출현억제작용,병립즉체도고봉[억제솔위(22.4±1.7)%],기후억제작용불수시간적연장이증강.(4)1 000 U/ml IFN-γ작용48 h 후,여대조상비,SKOV3세포장중적종색과립명현감소.결론 IFN-γ가이재핵산화단백수평하조란소암세포분비VEGF.