CAJ | 학술논문

目的研究白细胞介素(IL)12转染入树突状细胞(DC)后,与新建卵巢上皮性癌细胞融合形成融合细胞,分析融合细胞的体外免疫杀伤效应.方法以新鲜卵巢上皮性癌组织建立卵巢上皮性癌细胞系,并进行鉴定.体外诱导产生人脐血DC.将IL-12与pcDNA3.1(+)质粒连接后,分别通过脂质体法和电穿孔法将IL-12-pcDNA3.1(+)质粒转染DC,再使用聚乙二酸法将新建卵巢上皮性癌细胞与转染IL-12的DC融合,用四甲基偶氮唑蓝法检测融合细胞的体外免疫杀伤效应.结果(1)形态学观察和免疫组化法检测结果均证实,新建卵巢上皮性癌细胞系为原代卵巢上皮性癌细胞.(2)人脐血培养7～10 d,贴壁细胞出现大量毛刺状突起;免疫荧光染色显示,脐血DC主要组织相容性复合物Ⅱ类分子人白细胞抗原(HLA)-DR的阳性表达率为99%,共刺激分子B7-2的阳性表达率为50%.(3)RT-PCR技术检测结果证实IL-12转染DC成功.将转染IL-12的DC与新建卵巢上皮性癌细胞融合,RT-PCR技术和免疫荧光染色分析结果均证实融合细胞形成.(4)将转染IL-12的DC和新建卵巢上皮性癌的融合细胞、DC和新建卵巢上皮性癌的融合细胞分别与患者的外周血单个核细胞共同培养,激活T淋巴细胞,结果显示,两种活化后的T淋巴细胞均能杀伤新建卵巢上皮性癌细胞,且前者作用更强.结论转染IL-12后的DC与新建卵巢上皮性癌细胞融合后形成的融合细胞能激活T淋巴细胞,且其体外免疫杀伤效应更强.
목적연구백세포개소(IL)12전염입수돌상세포(DC)후,여신건란소상피성암세포융합형성융합세포,분석융합세포적체외면역살상효응.방법이신선란소상피성암조직건립란소상피성암세포계,병진행감정.체외유도산생인제혈DC.장IL-12여pcDNA3.1(+)질립련접후,분별통과지질체법화전천공법장IL-12-pcDNA3.1(+)질립전염DC,재사용취을이산법장신건란소상피성암세포여전염IL-12적DC융합,용사갑기우담서람법검측융합세포적체외면역살상효응.결과(1)형태학관찰화면역조화법검측결과균증실,신건란소상피성암세포계위원대란소상피성암세포.(2)인제혈배양7～10 d,첩벽세포출현대량모자상돌기;면역형광염색현시,제혈DC주요조직상용성복합물Ⅱ류분자인백세포항원(HLA)-DR적양성표체솔위99%,공자격분자B7-2적양성표체솔위50%.(3)RT-PCR기술검측결과증실IL-12전염DC성공.장전염IL-12적DC여신건란소상피성암세포융합,RT-PCR기술화면역형광염색분석결과균증실융합세포형성.(4)장전염IL-12적DC화신건란소상피성암적융합세포、DC화신건란소상피성암적융합세포분별여환자적외주혈단개핵세포공동배양,격활T림파세포,결과현시,량충활화후적T림파세포균능살상신건란소상피성암세포,차전자작용경강.결론전염IL-12후적DC여신건란소상피성암세포융합후형성적융합세포능격활T림파세포,차기체외면역살상효응경강.