四川大学学报（自然科学版）
四川大學學報（自然科學版）
사천대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY（NATURAL SCIENCE EDITION）
2012年
2期
465-470
,共6页
张帆%高顺%温馨%谢之易%鲍锦库
張帆%高順%溫馨%謝之易%鮑錦庫
장범%고순%온형%사지역%포금고
风雨花凝集素%大肠杆菌%表达条件%重组蛋白%包涵体
風雨花凝集素%大腸桿菌%錶達條件%重組蛋白%包涵體
풍우화응집소%대장간균%표체조건%중조단백%포함체
为提高重组表达质粒pET32c-ZGA在大肠杆菌中的表达量,对表达重组风雨花凝集素基因工程菌的培养条件进行优化筛选,对影响蛋白质表达量和工程菌生长的因素如pH值、诱导温度、IPTG、接种量、诱导时间、补充碳源形式、诱导时机、无机离子等进行了探索.经过优化,重组融合目的蛋白占菌体总蛋白的61.8％,比优化前提高了13.4％.条件优化后,pET32c-ZGA工程菌经过放大培养,获得6 g/L的湿菌体量,超声波破碎菌体,SDS-PAGE证实重组融合蛋白以包涵体形式表达.
為提高重組錶達質粒pET32c-ZGA在大腸桿菌中的錶達量,對錶達重組風雨花凝集素基因工程菌的培養條件進行優化篩選,對影響蛋白質錶達量和工程菌生長的因素如pH值、誘導溫度、IPTG、接種量、誘導時間、補充碳源形式、誘導時機、無機離子等進行瞭探索.經過優化,重組融閤目的蛋白佔菌體總蛋白的61.8％,比優化前提高瞭13.4％.條件優化後,pET32c-ZGA工程菌經過放大培養,穫得6 g/L的濕菌體量,超聲波破碎菌體,SDS-PAGE證實重組融閤蛋白以包涵體形式錶達.
위제고중조표체질립pET32c-ZGA재대장간균중적표체량,대표체중조풍우화응집소기인공정균적배양조건진행우화사선,대영향단백질표체량화공정균생장적인소여pH치、유도온도、IPTG、접충량、유도시간、보충탄원형식、유도시궤、무궤리자등진행료탐색.경과우화,중조융합목적단백점균체총단백적61.8％,비우화전제고료13.4％.조건우화후,pET32c-ZGA공정균경과방대배양,획득6 g/L적습균체량,초성파파쇄균체,SDS-PAGE증실중조융합단백이포함체형식표체.
