中国普外基础与临床杂志
中國普外基礎與臨床雜誌
중국보외기출여림상잡지
CHINESE JOURNAL OF BASES AND CLINICS IN GENERAL SURGERY
2011年
11期
1160-1164
,共5页
张晓耀%康骅%孙海晨%刘爽%崔叶青%张琳%蔡伟
張曉耀%康驊%孫海晨%劉爽%崔葉青%張琳%蔡偉
장효요%강화%손해신%류상%최협청%장림%채위
乳腺癌%间质%成纤维细胞%培养%鉴定
乳腺癌%間質%成纖維細胞%培養%鑒定
유선암%간질%성섬유세포%배양%감정
目的 探讨乳腺癌间质成纤维细胞(BCSFs)分离、培养及鉴定的方法,为其功能的研究奠定基础.方法 在无菌条件下,术中留取乳腺癌切除标本的部分癌组织块,剪切成1 mm×1 mm×1 mm大小块后采用振荡联合Ⅰ型胶原酶和透明质酸酶消化法分离、培养癌组织间质成纤维细胞.通过观察细胞形态、免疫组织化学检测(CK、Vimentin、α-SMA以及TE-7)和流式细胞仪测定以鉴定其是否为间质成纤维细胞.结果 培养24 h后有细胞贴壁生长,7～10 d左右细胞近融合,可传代培养.经鉴定,BCSFs分离、培养的成功率为90％(18/20),其细胞特点为:细胞呈扁平梭形,两端有细胞质突起,有一个扁平卵圆形囊状的核,胞浆丰富;免疫组织化学检测显示CK(-)、Vimentin(+)、α-SMA(+)、TE-7(+);流式细胞仪检测CD34和CD45均为(+).结论 振荡结合双酶消化法可有效地分离、培养BCSFs.本方法为进一步研究BCSFs提供了一种新的细胞来源途径.
目的 探討乳腺癌間質成纖維細胞(BCSFs)分離、培養及鑒定的方法,為其功能的研究奠定基礎.方法 在無菌條件下,術中留取乳腺癌切除標本的部分癌組織塊,剪切成1 mm×1 mm×1 mm大小塊後採用振盪聯閤Ⅰ型膠原酶和透明質痠酶消化法分離、培養癌組織間質成纖維細胞.通過觀察細胞形態、免疫組織化學檢測(CK、Vimentin、α-SMA以及TE-7)和流式細胞儀測定以鑒定其是否為間質成纖維細胞.結果 培養24 h後有細胞貼壁生長,7～10 d左右細胞近融閤,可傳代培養.經鑒定,BCSFs分離、培養的成功率為90％(18/20),其細胞特點為:細胞呈扁平梭形,兩耑有細胞質突起,有一箇扁平卵圓形囊狀的覈,胞漿豐富;免疫組織化學檢測顯示CK(-)、Vimentin(+)、α-SMA(+)、TE-7(+);流式細胞儀檢測CD34和CD45均為(+).結論 振盪結閤雙酶消化法可有效地分離、培養BCSFs.本方法為進一步研究BCSFs提供瞭一種新的細胞來源途徑.
목적 탐토유선암간질성섬유세포(BCSFs)분리、배양급감정적방법,위기공능적연구전정기출.방법 재무균조건하,술중류취유선암절제표본적부분암조직괴,전절성1 mm×1 mm×1 mm대소괴후채용진탕연합Ⅰ형효원매화투명질산매소화법분리、배양암조직간질성섬유세포.통과관찰세포형태、면역조직화학검측(CK、Vimentin、α-SMA이급TE-7)화류식세포의측정이감정기시부위간질성섬유세포.결과 배양24 h후유세포첩벽생장,7～10 d좌우세포근융합,가전대배양.경감정,BCSFs분리、배양적성공솔위90％(18/20),기세포특점위:세포정편평사형,량단유세포질돌기,유일개편평란원형낭상적핵,포장봉부;면역조직화학검측현시CK(-)、Vimentin(+)、α-SMA(+)、TE-7(+);류식세포의검측CD34화CD45균위(+).결론 진탕결합쌍매소화법가유효지분리、배양BCSFs.본방법위진일보연구BCSFs제공료일충신적세포래원도경.
