中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2006年
2期
124-126,138
,共4页
肖健%朱华松%尹娟%孙可芳%汪超英%端义坤%余模松
肖健%硃華鬆%尹娟%孫可芳%汪超英%耑義坤%餘模鬆
초건%주화송%윤연%손가방%왕초영%단의곤%여모송
人类免疫缺陷病毒%跨膜蛋白%截短%融合表达
人類免疫缺陷病毒%跨膜蛋白%截短%融閤錶達
인류면역결함병독%과막단백%절단%융합표체
目的将HIV-1的跨膜蛋白gp41和HIV-2跨膜蛋白gp36进行截短,并在大肠杆菌中进行融合表达.方法用PCR将gp41和gp36的编码基因进行截短,回收的PCR产物纯化后克隆到连接载体pGEM-T上,然后用BamH Ⅰ、EcoR Ⅰ和SalⅠ切下目的基因,并构建到表达载体pGEX-4T-3,导入宿主细胞BL21,用IPTG诱导表达.结果酶切鉴定显示,截短的HIV-1 gp41和HIV-2 gp36跨膜蛋白基因大小与预期的一致,表达产物经SDS-PAGE分析显示在相对分子质量66 000处出现融合表达条带,Western blot分析显示,与相应抗体出现特异性反应.结论已成功对gp41和gp36跨膜蛋白进行截短,并构建表达载体进行表达,为跨膜蛋白的进一步应用研究奠定基础.
目的將HIV-1的跨膜蛋白gp41和HIV-2跨膜蛋白gp36進行截短,併在大腸桿菌中進行融閤錶達.方法用PCR將gp41和gp36的編碼基因進行截短,迴收的PCR產物純化後剋隆到連接載體pGEM-T上,然後用BamH Ⅰ、EcoR Ⅰ和SalⅠ切下目的基因,併構建到錶達載體pGEX-4T-3,導入宿主細胞BL21,用IPTG誘導錶達.結果酶切鑒定顯示,截短的HIV-1 gp41和HIV-2 gp36跨膜蛋白基因大小與預期的一緻,錶達產物經SDS-PAGE分析顯示在相對分子質量66 000處齣現融閤錶達條帶,Western blot分析顯示,與相應抗體齣現特異性反應.結論已成功對gp41和gp36跨膜蛋白進行截短,併構建錶達載體進行錶達,為跨膜蛋白的進一步應用研究奠定基礎.
목적장HIV-1적과막단백gp41화HIV-2과막단백gp36진행절단,병재대장간균중진행융합표체.방법용PCR장gp41화gp36적편마기인진행절단,회수적PCR산물순화후극륭도련접재체pGEM-T상,연후용BamH Ⅰ、EcoR Ⅰ화SalⅠ절하목적기인,병구건도표체재체pGEX-4T-3,도입숙주세포BL21,용IPTG유도표체.결과매절감정현시,절단적HIV-1 gp41화HIV-2 gp36과막단백기인대소여예기적일치,표체산물경SDS-PAGE분석현시재상대분자질량66 000처출현융합표체조대,Western blot분석현시,여상응항체출현특이성반응.결론이성공대gp41화gp36과막단백진행절단,병구건표체재체진행표체,위과막단백적진일보응용연구전정기출.
