肿瘤预防与治疗
腫瘤預防與治療
종류예방여치료
JOURNAL OF CANCER CONTROL AND TREATMENT
2011年
1期
4-8
,共5页
张国桥%陈宏%刘跃%凌贤龙
張國橋%陳宏%劉躍%凌賢龍
장국교%진굉%류약%릉현룡
重组载体Pmito-RFP-CO I%构建%线粒体的功能
重組載體Pmito-RFP-CO I%構建%線粒體的功能
중조재체Pmito-RFP-CO I%구건%선립체적공능
目的:构建含线粒体编码的细胞色素氧化酶亚单位I基因并使其转染入PoSK-Hep1细胞,并对其构建的载体的生物学行为及表达进行观察及检测.方法:应用真核表达载体Pmito-RFP质粒构建含线粒体编码的细胞色素C氧化酶亚单位I,将表达载体PCO I-mito-RFP转染至PoSK-Hep1细胞内,MTT法检测生长状况、Western blotting检测细胞色素氧化酶亚单位I(Cytoehrome oxidase subunit I,CO I)蛋白的表达.结果:成功构建了含线粒体编码的细胞色素氧化酶亚单位I的重组载体Pmito-RFP-COX I,并以其转染PoSK-Hep1,MTT法测定发现重组载体COX I PoSk-Hep1的生长速度快于其母本细胞株Sk-Hep1,低于线粒体DNA完全缺失的人肝癌细胞PoSk-Hep1,Western blotting检测转染细胞可见COX I蛋白的表达.结论:成功构建了线粒体编码的细胞色素氧化酶亚单位I的重组载体Pmito-RFP-CO I,发现其生长速度快于其母本细胞株Sk-Hep1,低于线粒体DNA完全缺失的人肝癌细胞PoSk-Hep1,部分恢复了线粒体的功能.
目的:構建含線粒體編碼的細胞色素氧化酶亞單位I基因併使其轉染入PoSK-Hep1細胞,併對其構建的載體的生物學行為及錶達進行觀察及檢測.方法:應用真覈錶達載體Pmito-RFP質粒構建含線粒體編碼的細胞色素C氧化酶亞單位I,將錶達載體PCO I-mito-RFP轉染至PoSK-Hep1細胞內,MTT法檢測生長狀況、Western blotting檢測細胞色素氧化酶亞單位I(Cytoehrome oxidase subunit I,CO I)蛋白的錶達.結果:成功構建瞭含線粒體編碼的細胞色素氧化酶亞單位I的重組載體Pmito-RFP-COX I,併以其轉染PoSK-Hep1,MTT法測定髮現重組載體COX I PoSk-Hep1的生長速度快于其母本細胞株Sk-Hep1,低于線粒體DNA完全缺失的人肝癌細胞PoSk-Hep1,Western blotting檢測轉染細胞可見COX I蛋白的錶達.結論:成功構建瞭線粒體編碼的細胞色素氧化酶亞單位I的重組載體Pmito-RFP-CO I,髮現其生長速度快于其母本細胞株Sk-Hep1,低于線粒體DNA完全缺失的人肝癌細胞PoSk-Hep1,部分恢複瞭線粒體的功能.
목적:구건함선립체편마적세포색소양화매아단위I기인병사기전염입PoSK-Hep1세포,병대기구건적재체적생물학행위급표체진행관찰급검측.방법:응용진핵표체재체Pmito-RFP질립구건함선립체편마적세포색소C양화매아단위I,장표체재체PCO I-mito-RFP전염지PoSK-Hep1세포내,MTT법검측생장상황、Western blotting검측세포색소양화매아단위I(Cytoehrome oxidase subunit I,CO I)단백적표체.결과:성공구건료함선립체편마적세포색소양화매아단위I적중조재체Pmito-RFP-COX I,병이기전염PoSK-Hep1,MTT법측정발현중조재체COX I PoSk-Hep1적생장속도쾌우기모본세포주Sk-Hep1,저우선립체DNA완전결실적인간암세포PoSk-Hep1,Western blotting검측전염세포가견COX I단백적표체.결론:성공구건료선립체편마적세포색소양화매아단위I적중조재체Pmito-RFP-CO I,발현기생장속도쾌우기모본세포주Sk-Hep1,저우선립체DNA완전결실적인간암세포PoSk-Hep1,부분회복료선립체적공능.
