CAJ | 학술논문

背景:骨髓间充质干细胞经过诱导因素刺激后,能够分化为心肌细胞,同时表达缝隙连接蛋白43,移植后可改善心功能或修复受损的心脏起搏传导系统.而缝隙国连接蛋白43在维持心脏正常功能中发挥着重要作用.目的:观察兔骨髓间充质干细胞体外诱导分化为心肌样细胞过程中缝隙连接蛋白43的表达变化,及诱导后骨髓间充质干细胞间隙连接通讯功能的改变.方法:采用Percoll非密度梯度离心法与贴瞳法分离培养兔骨髓问充质干细胞,正常组不进行任何干预,诱导组加入5-氮胞苷向心肌样细胞诱导,免疫荧光及流式细胞仪检验细胞诱导前后缝隙连接蛋白43的表达.将原代培养1 d的乳鼠心肌细胞分别接种于上述两组细胞爬片上,免疫荧光观察兔骨髓间充质干细胞与心肌细胞形成间隙连接的情况.划痕试验设立正常组、诱导组以及添加甘草次酸的阻滞剂组,观察兔骨髓间充质干二细胞诱导前后细胞间隙连接的功能变化.结果与结论:正常组骨髓间充质干细胞缝隙连接蛋白43呈弱表达,5-氮胞营诱导2,4周后缝隙连接蛋白43的表达均显著增加(P<0.01),细胞间隙连接通讯功能明显增强(P<0.001),且随诱导时间的延长呈依赖性增强(P<0.05).骨髓间充质干细胞与心肌细胞共培养后,诱导组缝隙连接蛋白43明显呈线状表达在两个相邻细胞的接触面.与诱导4周时比较,阻滞剂组细胞问隙连接通讯功能明显受到抑制(P<0.001).提示骨髓间充质干细胞能够自发衷达缝隙连接蛋白43,在移植后早期能与心肌细胞形成间隙连接,从而有利于移植后心肌电传导,并发挥骨髓间充质干细胞的旁分泌效应.
배경:골수간충질간세포경과유도인소자격후,능구분화위심기세포,동시표체봉극련접단백43,이식후가개선심공능혹수복수손적심장기박전도계통.이봉극국련접단백43재유지심장정상공능중발휘착중요작용.목적:관찰토골수간충질간세포체외유도분화위심기양세포과정중봉극련접단백43적표체변화,급유도후골수간충질간세포간극련접통신공능적개변.방법:채용Percoll비밀도제도리심법여첩동법분리배양토골수문충질간세포,정상조불진행임하간예,유도조가입5-담포감향심기양세포유도,면역형광급류식세포의검험세포유도전후봉극련접단백43적표체.장원대배양1 d적유서심기세포분별접충우상술량조세포파편상,면역형광관찰토골수간충질간세포여심기세포형성간극련접적정황.화흔시험설립정상조、유도조이급첨가감초차산적조체제조,관찰토골수간충질간이세포유도전후세포간극련접적공능변화.결과여결론:정상조골수간충질간세포봉극련접단백43정약표체,5-담포영유도2,4주후봉극련접단백43적표체균현저증가(P<0.01),세포간극련접통신공능명현증강(P<0.001),차수유도시간적연장정의뢰성증강(P<0.05).골수간충질간세포여심기세포공배양후,유도조봉극련접단백43명현정선상표체재량개상린세포적접촉면.여유도4주시비교,조체제조세포문극련접통신공능명현수도억제(P<0.001).제시골수간충질간세포능구자발충체봉극련접단백43,재이식후조기능여심기세포형성간극련접,종이유리우이식후심기전전도,병발휘골수간충질간세포적방분비효응.