中国血吸虫病防治杂志
中國血吸蟲病防治雜誌
중국혈흡충병방치잡지
CHINESE JOURNAL OF SCHISTOSOMIASIS CONTROL
2010年
3期
228-232
,共5页
张纯%戴洋%王晓婷%鲁飞%唐建霞%赵松%朱荫昌
張純%戴洋%王曉婷%魯飛%唐建霞%趙鬆%硃蔭昌
장순%대양%왕효정%로비%당건하%조송%주음창
日本血吸虫%鞘脂激活蛋白样蛋白%基因%抗原性
日本血吸蟲%鞘脂激活蛋白樣蛋白%基因%抗原性
일본혈흡충%초지격활단백양단백%기인%항원성
目的 克隆并表达日本血吸虫鞘脂激活蛋白样蛋白(SLP),并对其免疫原性进行分析.方法 根据华支睾吸虫鞘脂激活蛋白样蛋白序列,采用tblastn法比对,在基因库中找出与之同源的日本血吸虫EST片段,并经过DNAStar、SignalP 3.0分析获得sj-SLP基因序列,经PCR扩增从日本血吸虫cDNA中获得的目的 基因克隆入原核表达载体pET15b,转化至大肠埃希菌BL21,异丙基巯基半乳糖诱导表达并纯化;采用Western blot分析其抗原性;用纯化的SLP重组蛋白免疫兔,ELISA检测免疫原性.结果 PCR扩增获得sj-SLP基因,约296 bp,并成功地进行了原核表达,纯化的表达产物重组Sj-SLP(rsj-SLP)能被感染兔血清识别,而不能被正常兔血清识别.rsj-SLP免疫兔可产生1:12 800的特异性抗体.结论 日本血吸虫存在鞘脂激活蛋白样蛋白,rsj-SLP具有较强的免疫原性和抗原性.
目的 剋隆併錶達日本血吸蟲鞘脂激活蛋白樣蛋白(SLP),併對其免疫原性進行分析.方法 根據華支睪吸蟲鞘脂激活蛋白樣蛋白序列,採用tblastn法比對,在基因庫中找齣與之同源的日本血吸蟲EST片段,併經過DNAStar、SignalP 3.0分析穫得sj-SLP基因序列,經PCR擴增從日本血吸蟲cDNA中穫得的目的 基因剋隆入原覈錶達載體pET15b,轉化至大腸埃希菌BL21,異丙基巰基半乳糖誘導錶達併純化;採用Western blot分析其抗原性;用純化的SLP重組蛋白免疫兔,ELISA檢測免疫原性.結果 PCR擴增穫得sj-SLP基因,約296 bp,併成功地進行瞭原覈錶達,純化的錶達產物重組Sj-SLP(rsj-SLP)能被感染兔血清識彆,而不能被正常兔血清識彆.rsj-SLP免疫兔可產生1:12 800的特異性抗體.結論 日本血吸蟲存在鞘脂激活蛋白樣蛋白,rsj-SLP具有較彊的免疫原性和抗原性.
목적 극륭병표체일본혈흡충초지격활단백양단백(SLP),병대기면역원성진행분석.방법 근거화지고흡충초지격활단백양단백서렬,채용tblastn법비대,재기인고중조출여지동원적일본혈흡충EST편단,병경과DNAStar、SignalP 3.0분석획득sj-SLP기인서렬,경PCR확증종일본혈흡충cDNA중획득적목적 기인극륭입원핵표체재체pET15b,전화지대장애희균BL21,이병기구기반유당유도표체병순화;채용Western blot분석기항원성;용순화적SLP중조단백면역토,ELISA검측면역원성.결과 PCR확증획득sj-SLP기인,약296 bp,병성공지진행료원핵표체,순화적표체산물중조Sj-SLP(rsj-SLP)능피감염토혈청식별,이불능피정상토혈청식별.rsj-SLP면역토가산생1:12 800적특이성항체.결론 일본혈흡충존재초지격활단백양단백,rsj-SLP구유교강적면역원성화항원성.
