中国医药指南
中國醫藥指南
중국의약지남
CHINA MEDICINE GUIDE
2010年
1期
50-52
,共3页
胰腺癌%吉西他滨%凋亡%p53正向凋亡调控因子
胰腺癌%吉西他濱%凋亡%p53正嚮凋亡調控因子
이선암%길서타빈%조망%p53정향조망조공인자
目的 研究吉西他滨体外对人胰腺癌AsPC-1细胞生长的作用机制.方法 用脂质体转染法将PUMA反义核酸(反义PUMA cDNA)的真核表达载体pcDNA3.1-PUMAAS和空载体pcDNA3.1-导入AsPC-1细胞,G418筛选阳性细胞,获得稳定转染的阳性克隆.将转染载体的AsPC-1阳性克隆细胞和未转染载体的AsPC-1细胞分别暴露于浓度1、5、10和15mol/L的吉西他滨中作用72h..RT-PCR和Western blotting检测不同组细胞经吉西他滨作用72h后的PUMA表达;MTT检测细胞生长抑制,流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡,Hoechst 33258荧光染色法和末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测细胞的凋亡.结果 吉西他滨促进AsPC-1细胞凋亡,抑制细胞生长,并有明显的剂量依赖性,在细胞凋亡的同时伴有PUMA表达的上调;当细胞转染PUMA反义核酸抑制PUMA表达后,受吉西他滨作用的细胞出现PUMA蛋白表达明显降低,同时伴有细胞凋亡的抑制及细胞的明显增殖.结论 吉西他滨促进体外AsPC-1细胞凋亡,并抑制其生长,其诱导凋亡与上调PUMA有关.
目的 研究吉西他濱體外對人胰腺癌AsPC-1細胞生長的作用機製.方法 用脂質體轉染法將PUMA反義覈痠(反義PUMA cDNA)的真覈錶達載體pcDNA3.1-PUMAAS和空載體pcDNA3.1-導入AsPC-1細胞,G418篩選暘性細胞,穫得穩定轉染的暘性剋隆.將轉染載體的AsPC-1暘性剋隆細胞和未轉染載體的AsPC-1細胞分彆暴露于濃度1、5、10和15mol/L的吉西他濱中作用72h..RT-PCR和Western blotting檢測不同組細胞經吉西他濱作用72h後的PUMA錶達;MTT檢測細胞生長抑製,流式細胞儀(FCM)檢測細胞凋亡,Hoechst 33258熒光染色法和末耑脫氧覈苷痠轉移酶介導的dUTP缺口末耑標記(TUNEL)法檢測細胞的凋亡.結果 吉西他濱促進AsPC-1細胞凋亡,抑製細胞生長,併有明顯的劑量依賴性,在細胞凋亡的同時伴有PUMA錶達的上調;噹細胞轉染PUMA反義覈痠抑製PUMA錶達後,受吉西他濱作用的細胞齣現PUMA蛋白錶達明顯降低,同時伴有細胞凋亡的抑製及細胞的明顯增殖.結論 吉西他濱促進體外AsPC-1細胞凋亡,併抑製其生長,其誘導凋亡與上調PUMA有關.
목적 연구길서타빈체외대인이선암AsPC-1세포생장적작용궤제.방법 용지질체전염법장PUMA반의핵산(반의PUMA cDNA)적진핵표체재체pcDNA3.1-PUMAAS화공재체pcDNA3.1-도입AsPC-1세포,G418사선양성세포,획득은정전염적양성극륭.장전염재체적AsPC-1양성극륭세포화미전염재체적AsPC-1세포분별폭로우농도1、5、10화15mol/L적길서타빈중작용72h..RT-PCR화Western blotting검측불동조세포경길서타빈작용72h후적PUMA표체;MTT검측세포생장억제,류식세포의(FCM)검측세포조망,Hoechst 33258형광염색법화말단탈양핵감산전이매개도적dUTP결구말단표기(TUNEL)법검측세포적조망.결과 길서타빈촉진AsPC-1세포조망,억제세포생장,병유명현적제량의뢰성,재세포조망적동시반유PUMA표체적상조;당세포전염PUMA반의핵산억제PUMA표체후,수길서타빈작용적세포출현PUMA단백표체명현강저,동시반유세포조망적억제급세포적명현증식.결론 길서타빈촉진체외AsPC-1세포조망,병억제기생장,기유도조망여상조PUMA유관.
