中国微生态学杂志
中國微生態學雜誌
중국미생태학잡지
CHINESE JOURNAL OF MICROECOLOGY
2008年
6期
547-549
,共3页
刘鹏%赵宝昌%樊建慧%田余祥%杨帆%崔秀云
劉鵬%趙寶昌%樊建慧%田餘祥%楊帆%崔秀雲
류붕%조보창%번건혜%전여상%양범%최수운
人核糖核酸酶抑制因子%腺病毒载体%基因治疗
人覈糖覈痠酶抑製因子%腺病毒載體%基因治療
인핵당핵산매억제인자%선병독재체%기인치료
目的 构建含有人核糖核酸酶抑制因子(hRl)基因的重组腺病毒载体.方法 以含有全长cDNA的pT7-RI为模板,PCR扩增hRI,经T载体克隆后,酶切亚克隆到穿梭质粒pAdTrack-CMV上,在BJ5183细菌内和pAdEasy-1同源重组.筛选阳性克隆,酶切、PCR及测序鉴定,线性化后脂质体法转染293细胞进行包装、扩增.通过观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达及PCR扩增目的 基因等方法鉴定重组的腺病毒.结果 酶切鉴定及PCR结果证明hRI基因重组腺病毒载体构建成功,病毒滴度为1.5×10<'10>pfu/ml.结论 应用细菌内同源重组法成功构建了含hRI,基因的重组腺病毒载体.
目的 構建含有人覈糖覈痠酶抑製因子(hRl)基因的重組腺病毒載體.方法 以含有全長cDNA的pT7-RI為模闆,PCR擴增hRI,經T載體剋隆後,酶切亞剋隆到穿梭質粒pAdTrack-CMV上,在BJ5183細菌內和pAdEasy-1同源重組.篩選暘性剋隆,酶切、PCR及測序鑒定,線性化後脂質體法轉染293細胞進行包裝、擴增.通過觀察綠色熒光蛋白(GFP)的錶達及PCR擴增目的 基因等方法鑒定重組的腺病毒.結果 酶切鑒定及PCR結果證明hRI基因重組腺病毒載體構建成功,病毒滴度為1.5×10<'10>pfu/ml.結論 應用細菌內同源重組法成功構建瞭含hRI,基因的重組腺病毒載體.
목적 구건함유인핵당핵산매억제인자(hRl)기인적중조선병독재체.방법 이함유전장cDNA적pT7-RI위모판,PCR확증hRI,경T재체극륭후,매절아극륭도천사질립pAdTrack-CMV상,재BJ5183세균내화pAdEasy-1동원중조.사선양성극륭,매절、PCR급측서감정,선성화후지질체법전염293세포진행포장、확증.통과관찰록색형광단백(GFP)적표체급PCR확증목적 기인등방법감정중조적선병독.결과 매절감정급PCR결과증명hRI기인중조선병독재체구건성공,병독적도위1.5×10<'10>pfu/ml.결론 응용세균내동원중조법성공구건료함hRI,기인적중조선병독재체.
