汉坦病毒SEO型S基因的克隆及在大肠杆菌中的高效表达
한탄병독SEO형S기인적극륭급재대장간균중적고효표체
Cloning of S Gene of Hantavirus Type SEO and Its High Expression in E.coli
  • 万方数据
    中国生物制品学杂志 중국생물제품학잡지
    CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
    2008年 2期 111-114 ,共4页

    袁子国%张秀香%李修明%张守峰%徐慧娟%高胜岩%王晓虎%扈荣良

    원자국%장수향%리수명%장수봉%서혜연%고성암%왕효호%호영량

    汉坦病毒%SEO型%S基因%原核表达 漢坦病毒%SEO型%S基因%原覈錶達
    한탄병독%SEO형%S기인%원핵표체
    目的 构建汉坦病毒SEO型S基因原核表达载体.方法 应用RT-PCR方法扩增汉坦病毒SEO型的YZG-Changchun株S基因,克隆至pMD18-T载体中,经酶切鉴定及PCR分析后,定向克隆入原核表达载体pET-28a中,转化E.coli Rosetta,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot分析外源蛋白的表达情况.结果 表达载体经双酶切和测序证明构建正确.IPTG浓度为1.0mm ol/L,诱导4.5h时,S基因在原核细胞中得到了高效表达,表达的蛋白占菌体蛋白总量的37%,纯化后的蛋白具有良好的抗原活性.结论 已成功构建了汉坦病毒SEO型S基因原核表达载体,并得到高效表达.
    목적 구건한탄병독SEO형S기인원핵표체재체.방법 응용RT-PCR방법확증한탄병독SEO형적YZG-Changchun주S기인,극륭지pMD18-T재체중,경매절감정급PCR분석후,정향극륭입원핵표체재체pET-28a중,전화E.coli Rosetta,경IPTG유도표체,SDS-PAGE화Western blot분석외원단백적표체정황.결과 표체재체경쌍매절화측서증명구건정학.IPTG농도위1.0mm ol/L,유도4.5h시,S기인재원핵세포중득도료고효표체,표체적단백점균체단백총량적37%,순화후적단백구유량호적항원활성.결론 이성공구건료한탄병독SEO형S기인원핵표체재체,병득도고효표체.
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