眼科学报
眼科學報
안과학보
EYE SCIENCE
2007年
4期
212-218
,共7页
聂玉红%邓江云%刘思玲%黄强%吴开力
聶玉紅%鄧江雲%劉思玲%黃彊%吳開力
섭옥홍%산강운%류사령%황강%오개력
单纯疱疹病毒%视网膜色素上皮细胞%细胞增殖%细胞周期
單純皰疹病毒%視網膜色素上皮細胞%細胞增殖%細胞週期
단순포진병독%시망막색소상피세포%세포증식%세포주기
目的:建立单纯疱疹病毒1型(Herpes simplex virus,HSV-1)感染人视网膜色素上皮细胞(Retinal pigment epithelial,RPE)的体外模型,观察HSV-1感染对体外培养RPE细胞生长的影响.方法:以感染复数(MOI)为5的HSV-1(F株)感染体外培养的RPE细胞.用相差显微镜观察RPE细胞的形态变化;用MTT法、流式细胞术观察HSV-1感染对RPE细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响;用PCR和免疫荧光法验证HSV-1感染RPE细胞是否成功.结果:成功在体外建立了HSV-1感染RPE的细胞模型.HSV-1感染RPE细胞8 h后出现病变,细胞形态开始变得细长和皱缩;感染24 h后细胞病变更加明显,细胞间间隙增加,甚至可见多核巨细胞;感染48 h后所有细胞均变圆,细胞开始出现脱落甚至死亡.MTT法显示HSV-1感染RPE后24 h和48 h能抑制细胞生长(P＜0.01),细胞的抑制率分别为(16.37±3.28)%和(47.91±6.39)%;流式细胞仪检测发现HSV-1感染可影响RPE细胞的细胞周期,但对细胞凋亡无明显影响.结论:HSV-1能感染体外培养的RPE细胞,抑制RPE细胞的增殖,并影响RPE细胞的细胞周期.
目的:建立單純皰疹病毒1型(Herpes simplex virus,HSV-1)感染人視網膜色素上皮細胞(Retinal pigment epithelial,RPE)的體外模型,觀察HSV-1感染對體外培養RPE細胞生長的影響.方法:以感染複數(MOI)為5的HSV-1(F株)感染體外培養的RPE細胞.用相差顯微鏡觀察RPE細胞的形態變化;用MTT法、流式細胞術觀察HSV-1感染對RPE細胞增殖、凋亡和細胞週期的影響;用PCR和免疫熒光法驗證HSV-1感染RPE細胞是否成功.結果:成功在體外建立瞭HSV-1感染RPE的細胞模型.HSV-1感染RPE細胞8 h後齣現病變,細胞形態開始變得細長和皺縮;感染24 h後細胞病變更加明顯,細胞間間隙增加,甚至可見多覈巨細胞;感染48 h後所有細胞均變圓,細胞開始齣現脫落甚至死亡.MTT法顯示HSV-1感染RPE後24 h和48 h能抑製細胞生長(P＜0.01),細胞的抑製率分彆為(16.37±3.28)%和(47.91±6.39)%;流式細胞儀檢測髮現HSV-1感染可影響RPE細胞的細胞週期,但對細胞凋亡無明顯影響.結論:HSV-1能感染體外培養的RPE細胞,抑製RPE細胞的增殖,併影響RPE細胞的細胞週期.
목적:건립단순포진병독1형(Herpes simplex virus,HSV-1)감염인시망막색소상피세포(Retinal pigment epithelial,RPE)적체외모형,관찰HSV-1감염대체외배양RPE세포생장적영향.방법:이감염복수(MOI)위5적HSV-1(F주)감염체외배양적RPE세포.용상차현미경관찰RPE세포적형태변화;용MTT법、류식세포술관찰HSV-1감염대RPE세포증식、조망화세포주기적영향;용PCR화면역형광법험증HSV-1감염RPE세포시부성공.결과:성공재체외건립료HSV-1감염RPE적세포모형.HSV-1감염RPE세포8 h후출현병변,세포형태개시변득세장화추축;감염24 h후세포병변경가명현,세포간간극증가,심지가견다핵거세포;감염48 h후소유세포균변원,세포개시출현탈락심지사망.MTT법현시HSV-1감염RPE후24 h화48 h능억제세포생장(P＜0.01),세포적억제솔분별위(16.37±3.28)%화(47.91±6.39)%;류식세포의검측발현HSV-1감염가영향RPE세포적세포주기,단대세포조망무명현영향.결론:HSV-1능감염체외배양적RPE세포,억제RPE세포적증식,병영향RPE세포적세포주기.
