中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2007年
50期
10105-10108
,共4页
李世林%王行环%杨中华%蒲小勇%高炜城
李世林%王行環%楊中華%蒲小勇%高煒城
리세림%왕행배%양중화%포소용%고위성
生精细胞%细胞分离%机械分离法%组合酶消化法%大鼠
生精細胞%細胞分離%機械分離法%組閤酶消化法%大鼠
생정세포%세포분리%궤계분리법%조합매소화법%대서
目的:采用机械分离法和组合酶消化法分离大鼠生精细胞,比较两者在细胞数量、细胞纯度及存活率等方面的优劣.方法:实验于2007-03/05在广东省人民医院医学研究中心进行.分别采用机械分离法和组合酶消化法分离成年SD大鼠睾丸生精细胞,即机械分离法采用锐性分离结合筛网过滤,依次将间质细胞、血细胞剔除,经过滤筛选后,获得较为纯净的生精细胞,最后经差速贴壁法获得纯度较高的生精细胞.组合酶消化法采用胶原酶和胰酶消化相结合的方法,首先用胶原酶Ⅳ将间质细胞分离出来,经胰酶消化后获得单细胞的生精细胞悬液.分析比较两者所得细胞总数及细胞纯度的差异,并检测分离培养前后细胞存活率的变化.结果:组合酶消化法分离的生精细胞数量与机械分离法相当,两者比较差异无显著性意义(P>0.05).但机械分离法所得生精细胞的纯度高于组合酶消化法,并且分离培养前后细胞存活率也明显高于组合酶消化法,两两比较差异均有显著性意义(P<0.05).机械分离法所得生精细胞悬液中以支持细胞混杂为主,而组合酶消化法则混杂较多支持细胞和间质细胞.结论:机械分离法分离生精细胞纯度高、细胞存活率高及费用低,是一种简单、经济、有效的生精细胞分离方法.
目的:採用機械分離法和組閤酶消化法分離大鼠生精細胞,比較兩者在細胞數量、細胞純度及存活率等方麵的優劣.方法:實驗于2007-03/05在廣東省人民醫院醫學研究中心進行.分彆採用機械分離法和組閤酶消化法分離成年SD大鼠睪汍生精細胞,即機械分離法採用銳性分離結閤篩網過濾,依次將間質細胞、血細胞剔除,經過濾篩選後,穫得較為純淨的生精細胞,最後經差速貼壁法穫得純度較高的生精細胞.組閤酶消化法採用膠原酶和胰酶消化相結閤的方法,首先用膠原酶Ⅳ將間質細胞分離齣來,經胰酶消化後穫得單細胞的生精細胞懸液.分析比較兩者所得細胞總數及細胞純度的差異,併檢測分離培養前後細胞存活率的變化.結果:組閤酶消化法分離的生精細胞數量與機械分離法相噹,兩者比較差異無顯著性意義(P>0.05).但機械分離法所得生精細胞的純度高于組閤酶消化法,併且分離培養前後細胞存活率也明顯高于組閤酶消化法,兩兩比較差異均有顯著性意義(P<0.05).機械分離法所得生精細胞懸液中以支持細胞混雜為主,而組閤酶消化法則混雜較多支持細胞和間質細胞.結論:機械分離法分離生精細胞純度高、細胞存活率高及費用低,是一種簡單、經濟、有效的生精細胞分離方法.
목적:채용궤계분리법화조합매소화법분리대서생정세포,비교량자재세포수량、세포순도급존활솔등방면적우렬.방법:실험우2007-03/05재광동성인민의원의학연구중심진행.분별채용궤계분리법화조합매소화법분리성년SD대서고환생정세포,즉궤계분리법채용예성분리결합사망과려,의차장간질세포、혈세포척제,경과려사선후,획득교위순정적생정세포,최후경차속첩벽법획득순도교고적생정세포.조합매소화법채용효원매화이매소화상결합적방법,수선용효원매Ⅳ장간질세포분리출래,경이매소화후획득단세포적생정세포현액.분석비교량자소득세포총수급세포순도적차이,병검측분리배양전후세포존활솔적변화.결과:조합매소화법분리적생정세포수량여궤계분리법상당,량자비교차이무현저성의의(P>0.05).단궤계분리법소득생정세포적순도고우조합매소화법,병차분리배양전후세포존활솔야명현고우조합매소화법,량량비교차이균유현저성의의(P<0.05).궤계분리법소득생정세포현액중이지지세포혼잡위주,이조합매소화법칙혼잡교다지지세포화간질세포.결론:궤계분리법분리생정세포순도고、세포존활솔고급비용저,시일충간단、경제、유효적생정세포분리방법.