中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2008年
1期
136-139
,共4页
王云华%王睿睿%杨柳萌%李健峰%徐维明%郑永唐
王雲華%王睿睿%楊柳萌%李健峰%徐維明%鄭永唐
왕운화%왕예예%양류맹%리건봉%서유명%정영당
HIV-1%NCp7%表达%纯化%抑制剂%筛选
HIV-1%NCp7%錶達%純化%抑製劑%篩選
HIV-1%NCp7%표체%순화%억제제%사선
目的 表达HIV-1核衣壳蛋白(nucleocapside protein p7,NCp7),并建立抑制剂筛选方法.方法 从pBRU2/ADP202质粒经PCR得到HIV-1 NCp7编码序列,克隆到pet28a 质粒中构建HIV-1 NCp7表达载体.阳性克隆转染E.coli BL21 DE3,以IPTG诱导,细胞裂解液经Q Sepharose H.P和SP Sepharose H.P纯化后纯度达到90%以上.将具有锌离子逐出活性的H2O2和2,2'-联硫基二吡啶(2,2'-dithiodipyridine,AT-2)与NCp7作用,用锌离子特异的荧光染料检测.用该方法检测KIZ-CM系列化合物.结果 可以检测H2O2和AT-2的锌离子逐出活性,经该方法筛选,KIZ-CM 10,18,19等化合物具有一定的锌离子逐出活性.结论 在国内首次建立了HIV-1 NCp7锌离子逐出方法,该方法可以用于NCp7抑制剂的筛选.
目的 錶達HIV-1覈衣殼蛋白(nucleocapside protein p7,NCp7),併建立抑製劑篩選方法.方法 從pBRU2/ADP202質粒經PCR得到HIV-1 NCp7編碼序列,剋隆到pet28a 質粒中構建HIV-1 NCp7錶達載體.暘性剋隆轉染E.coli BL21 DE3,以IPTG誘導,細胞裂解液經Q Sepharose H.P和SP Sepharose H.P純化後純度達到90%以上.將具有鋅離子逐齣活性的H2O2和2,2'-聯硫基二吡啶(2,2'-dithiodipyridine,AT-2)與NCp7作用,用鋅離子特異的熒光染料檢測.用該方法檢測KIZ-CM繫列化閤物.結果 可以檢測H2O2和AT-2的鋅離子逐齣活性,經該方法篩選,KIZ-CM 10,18,19等化閤物具有一定的鋅離子逐齣活性.結論 在國內首次建立瞭HIV-1 NCp7鋅離子逐齣方法,該方法可以用于NCp7抑製劑的篩選.
목적 표체HIV-1핵의각단백(nucleocapside protein p7,NCp7),병건립억제제사선방법.방법 종pBRU2/ADP202질립경PCR득도HIV-1 NCp7편마서렬,극륭도pet28a 질립중구건HIV-1 NCp7표체재체.양성극륭전염E.coli BL21 DE3,이IPTG유도,세포렬해액경Q Sepharose H.P화SP Sepharose H.P순화후순도체도90%이상.장구유자리자축출활성적H2O2화2,2'-련류기이필정(2,2'-dithiodipyridine,AT-2)여NCp7작용,용자리자특이적형광염료검측.용해방법검측KIZ-CM계렬화합물.결과 가이검측H2O2화AT-2적자리자축출활성,경해방법사선,KIZ-CM 10,18,19등화합물구유일정적자리자축출활성.결론 재국내수차건립료HIV-1 NCp7자리자축출방법,해방법가이용우NCp7억제제적사선.
