安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2007年
33期
10622-10623,10631
,共3页
庄娟%尤永进%陈波%饶忠%潘洁
莊娟%尤永進%陳波%饒忠%潘潔
장연%우영진%진파%요충%반길
口蹄疫病毒%VP1%细胞表位%产肠毒素大肠杆菌%LTB%免疫应答
口蹄疫病毒%VP1%細胞錶位%產腸毒素大腸桿菌%LTB%免疫應答
구제역병독%VP1%세포표위%산장독소대장간균%LTB%면역응답
[目的]为预防口蹄疫与幼畜腹泻、生产安全高效的基因工程联合疫苗提供试验依据.[方法]通过基因工程技术,把O型口蹄疫病毒VP1双拷贝21-40(20aa)与141-160(20aa)表位肽基因--2020VP1与产肠毒素大肠杆菌LTB连接到表达载体上,在大肠杆菌中表达出具有抗O型口蹄疫病毒与产肠毒素大肠杆菌双重作用的融合蛋白.[结果]运用基因工程技术构建了融合表达载体r2020-B-2020.转化宿主菌 BL21(DE3) RIL后的表达产物经SDS-PAGE分析,结果显示,重组融合蛋白的分子量约为41 kD,表达量较高.动物实验表明,融合蛋白能够诱发兔体产生较强的抗FMDV中和抗体,免疫豚鼠在低浓度FMDV刺激下产生特异性T淋巴细胞增殖反应,说明融合蛋白可以诱导机体产生有效的抗FMDV细胞及体液免疫反应.融合蛋白能够与霍乱毒素CTB抗体特异结合,免疫雌鼠能够抵抗一定强度的大肠杆菌毒株攻击.[结论]融合蛋白可以同时诱导机体产生较好的抗FMDV及ETEC免疫应答反应,具有开发成为FMDV与ETEC基因工程疫苗的应用价值.
[目的]為預防口蹄疫與幼畜腹瀉、生產安全高效的基因工程聯閤疫苗提供試驗依據.[方法]通過基因工程技術,把O型口蹄疫病毒VP1雙拷貝21-40(20aa)與141-160(20aa)錶位肽基因--2020VP1與產腸毒素大腸桿菌LTB連接到錶達載體上,在大腸桿菌中錶達齣具有抗O型口蹄疫病毒與產腸毒素大腸桿菌雙重作用的融閤蛋白.[結果]運用基因工程技術構建瞭融閤錶達載體r2020-B-2020.轉化宿主菌 BL21(DE3) RIL後的錶達產物經SDS-PAGE分析,結果顯示,重組融閤蛋白的分子量約為41 kD,錶達量較高.動物實驗錶明,融閤蛋白能夠誘髮兔體產生較彊的抗FMDV中和抗體,免疫豚鼠在低濃度FMDV刺激下產生特異性T淋巴細胞增殖反應,說明融閤蛋白可以誘導機體產生有效的抗FMDV細胞及體液免疫反應.融閤蛋白能夠與霍亂毒素CTB抗體特異結閤,免疫雌鼠能夠牴抗一定彊度的大腸桿菌毒株攻擊.[結論]融閤蛋白可以同時誘導機體產生較好的抗FMDV及ETEC免疫應答反應,具有開髮成為FMDV與ETEC基因工程疫苗的應用價值.
[목적]위예방구제역여유축복사、생산안전고효적기인공정연합역묘제공시험의거.[방법]통과기인공정기술,파O형구제역병독VP1쌍고패21-40(20aa)여141-160(20aa)표위태기인--2020VP1여산장독소대장간균LTB련접도표체재체상,재대장간균중표체출구유항O형구제역병독여산장독소대장간균쌍중작용적융합단백.[결과]운용기인공정기술구건료융합표체재체r2020-B-2020.전화숙주균 BL21(DE3) RIL후적표체산물경SDS-PAGE분석,결과현시,중조융합단백적분자량약위41 kD,표체량교고.동물실험표명,융합단백능구유발토체산생교강적항FMDV중화항체,면역돈서재저농도FMDV자격하산생특이성T림파세포증식반응,설명융합단백가이유도궤체산생유효적항FMDV세포급체액면역반응.융합단백능구여곽란독소CTB항체특이결합,면역자서능구저항일정강도적대장간균독주공격.[결론]융합단백가이동시유도궤체산생교호적항FMDV급ETEC면역응답반응,구유개발성위FMDV여ETEC기인공정역묘적응용개치.