细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2007年
10期
926-928
,共3页
王启明%贾连群%周鸿鹰%李云生
王啟明%賈連群%週鴻鷹%李雲生
왕계명%가련군%주홍응%리운생
Wnt/β-catenin%信号转导通路%肝癌%HepG2
Wnt/β-catenin%信號轉導通路%肝癌%HepG2
Wnt/β-catenin%신호전도통로%간암%HepG2
目的:比较Wnt/β-catenin信号分子在HepG2和L02细胞中的表达,探讨Wnt/β-catenin信号转导通路在肝癌发生中的作用机制,为肝癌的防治提供新的思路.方法:选取Wnt/β-catenin信号转导通路中上下游关键因子Wnt1、Wnt4、β-catenin、cyclin D1以及c-myc等,应用RT-PCR的方法观察他们在正常肝脏L02细胞和肝癌HepG2细胞中的转录水平.用免疫细胞化学染色方法和Western blot检测研究Wnt/β-catenin信号转导通路中最关键的成员β-catenin在上述2个细胞株中的定位和定量表达.结果:在正常的L02肝细胞中,用RT-PCR的方法未检测到Wnt1、Wnt4、cyclin D1以及c-myc的mRNA转录,只有β-catenin的基因被转录表达.同时用免疫细胞化学染色观察到β-catenin在L02细胞膜处存在表达.而在HepG2肿瘤细胞中,不仅检测到β-catenin的基因转录,同时也检测到Wnt1、cyclin D1以及c-myc的mRNA转录,只有Wnt4未转录.用免疫细胞化学的方法观察β-catenin在肿瘤细胞中的表达明显增强,表现为胞膜着色减弱而胞质甚至是胞核的阳性染色.采用Western blot检测也验证了β-catenin蛋白在肿瘤细胞中的表达水平明显高于正常细胞.结论:Wnt/β-catenin信号转导通路在人的肝癌细胞HepG2中存在异常活性,Wnt1可能是导致信号通路激活的始动因素之一.
目的:比較Wnt/β-catenin信號分子在HepG2和L02細胞中的錶達,探討Wnt/β-catenin信號轉導通路在肝癌髮生中的作用機製,為肝癌的防治提供新的思路.方法:選取Wnt/β-catenin信號轉導通路中上下遊關鍵因子Wnt1、Wnt4、β-catenin、cyclin D1以及c-myc等,應用RT-PCR的方法觀察他們在正常肝髒L02細胞和肝癌HepG2細胞中的轉錄水平.用免疫細胞化學染色方法和Western blot檢測研究Wnt/β-catenin信號轉導通路中最關鍵的成員β-catenin在上述2箇細胞株中的定位和定量錶達.結果:在正常的L02肝細胞中,用RT-PCR的方法未檢測到Wnt1、Wnt4、cyclin D1以及c-myc的mRNA轉錄,隻有β-catenin的基因被轉錄錶達.同時用免疫細胞化學染色觀察到β-catenin在L02細胞膜處存在錶達.而在HepG2腫瘤細胞中,不僅檢測到β-catenin的基因轉錄,同時也檢測到Wnt1、cyclin D1以及c-myc的mRNA轉錄,隻有Wnt4未轉錄.用免疫細胞化學的方法觀察β-catenin在腫瘤細胞中的錶達明顯增彊,錶現為胞膜著色減弱而胞質甚至是胞覈的暘性染色.採用Western blot檢測也驗證瞭β-catenin蛋白在腫瘤細胞中的錶達水平明顯高于正常細胞.結論:Wnt/β-catenin信號轉導通路在人的肝癌細胞HepG2中存在異常活性,Wnt1可能是導緻信號通路激活的始動因素之一.
목적:비교Wnt/β-catenin신호분자재HepG2화L02세포중적표체,탐토Wnt/β-catenin신호전도통로재간암발생중적작용궤제,위간암적방치제공신적사로.방법:선취Wnt/β-catenin신호전도통로중상하유관건인자Wnt1、Wnt4、β-catenin、cyclin D1이급c-myc등,응용RT-PCR적방법관찰타문재정상간장L02세포화간암HepG2세포중적전록수평.용면역세포화학염색방법화Western blot검측연구Wnt/β-catenin신호전도통로중최관건적성원β-catenin재상술2개세포주중적정위화정량표체.결과:재정상적L02간세포중,용RT-PCR적방법미검측도Wnt1、Wnt4、cyclin D1이급c-myc적mRNA전록,지유β-catenin적기인피전록표체.동시용면역세포화학염색관찰도β-catenin재L02세포막처존재표체.이재HepG2종류세포중,불부검측도β-catenin적기인전록,동시야검측도Wnt1、cyclin D1이급c-myc적mRNA전록,지유Wnt4미전록.용면역세포화학적방법관찰β-catenin재종류세포중적표체명현증강,표현위포막착색감약이포질심지시포핵적양성염색.채용Western blot검측야험증료β-catenin단백재종류세포중적표체수평명현고우정상세포.결론:Wnt/β-catenin신호전도통로재인적간암세포HepG2중존재이상활성,Wnt1가능시도치신호통로격활적시동인소지일.