基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2007年
10期
1156-1160
,共5页
梅毒螺旋体%TpN17重组抗原%酶联免疫吸附试验
梅毒螺鏇體%TpN17重組抗原%酶聯免疫吸附試驗
매독라선체%TpN17중조항원%매련면역흡부시험
目的 用基因工程技术表达梅毒螺旋体TpN17重组抗原,并建立操作简便、特异性好、敏感性高的梅毒血清抗体间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测.方法 采用PCR技术扩增梅毒螺旋体TpN17基因,再进行T-A克隆及测序,然后亚克隆到原核表达载体中,以亲和层析法纯化重组蛋白.将重组蛋白包被于反应板,建立检测血清中梅毒抗体的ELISA间接检测法,利用该法与梅毒螺旋体血凝试验(TPHA)、甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)同时检测血清样品,对其结果进行比较研究.结果 TpN17重组蛋白在大肠杆菌BL21中得到稳定表达,并成功建立了检测血清中梅毒抗体的ELISA间接检测法及试剂.对135例梅毒可疑患者血清进行检测,ELISA、TPHA和TRUST的检出阳性率分别为82.96%、98.52%和71.11%,而TRUST测出的8例可疑样品及31例阴性样品中,TPHA结果全部阳性、而ELISA只有2例阴性.结论 TpN17重组抗原ELISA试剂在特异性和敏感性上明显优于TRUST法.
目的 用基因工程技術錶達梅毒螺鏇體TpN17重組抗原,併建立操作簡便、特異性好、敏感性高的梅毒血清抗體間接酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測.方法 採用PCR技術擴增梅毒螺鏇體TpN17基因,再進行T-A剋隆及測序,然後亞剋隆到原覈錶達載體中,以親和層析法純化重組蛋白.將重組蛋白包被于反應闆,建立檢測血清中梅毒抗體的ELISA間接檢測法,利用該法與梅毒螺鏇體血凝試驗(TPHA)、甲苯胺紅不加熱血清試驗(TRUST)同時檢測血清樣品,對其結果進行比較研究.結果 TpN17重組蛋白在大腸桿菌BL21中得到穩定錶達,併成功建立瞭檢測血清中梅毒抗體的ELISA間接檢測法及試劑.對135例梅毒可疑患者血清進行檢測,ELISA、TPHA和TRUST的檢齣暘性率分彆為82.96%、98.52%和71.11%,而TRUST測齣的8例可疑樣品及31例陰性樣品中,TPHA結果全部暘性、而ELISA隻有2例陰性.結論 TpN17重組抗原ELISA試劑在特異性和敏感性上明顯優于TRUST法.
목적 용기인공정기술표체매독라선체TpN17중조항원,병건립조작간편、특이성호、민감성고적매독혈청항체간접매련면역흡부시험(ELISA)검측.방법 채용PCR기술확증매독라선체TpN17기인,재진행T-A극륭급측서,연후아극륭도원핵표체재체중,이친화층석법순화중조단백.장중조단백포피우반응판,건립검측혈청중매독항체적ELISA간접검측법,이용해법여매독라선체혈응시험(TPHA)、갑분알홍불가열혈청시험(TRUST)동시검측혈청양품,대기결과진행비교연구.결과 TpN17중조단백재대장간균BL21중득도은정표체,병성공건립료검측혈청중매독항체적ELISA간접검측법급시제.대135례매독가의환자혈청진행검측,ELISA、TPHA화TRUST적검출양성솔분별위82.96%、98.52%화71.11%,이TRUST측출적8례가의양품급31례음성양품중,TPHA결과전부양성、이ELISA지유2례음성.결론 TpN17중조항원ELISA시제재특이성화민감성상명현우우TRUST법.
