口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC基因重组杆状病毒的构建与表达
구제역병독비결구단백3ABC기인중조간상병독적구건여표체
Construction of recombinant baculovirus expressing of foot-and-mouth disease virus nonstructural protein 3ABC gene in Sf9 insect cell
  • 万方数据
    甘肃农业大学学报 감숙농업대학학보
    JOURNAL OF GANSU AGRICULTURAL UNIVERSITY
    2007年 4期 5-10 ,共6页

    马江涛%卢曾军%曹轶梅%郭慧琛%郭建宏%祝秀梅%刘在新%杨孝朴

    마강도%로증군%조질매%곽혜침%곽건굉%축수매%류재신%양효박

    口蹄疫病毒%3ABC基因%杆状病毒%Sf9细胞 口蹄疫病毒%3ABC基因%桿狀病毒%Sf9細胞
    구제역병독%3ABC기인%간상병독%Sf9세포
    通过设计特异引物,扩增获得口蹄疫病毒3ABC编码区的目的基因片段,将其用Sal Ⅰ和Nco Ⅰ双酶切后,与经同样处理的带有一段信号肽序列的穿梭质粒pMelBac-B连接,经筛选、鉴定及DNA序列分析后,获得重组质粒pMel-3ABC.将重组质粒与线性化的杆状病毒骨架Bac-N-Blue共转染Sf9昆虫细胞,通过噬斑筛选和PCR鉴定,获得了含有目的基因的重组杆状病毒.用重组病毒感染Sf9昆虫细胞,通过间接ELISA 方法,检测细胞培养基上清液中表达的口蹄疫病毒抗原.结果表明,口蹄疫病毒基因片段3ABC正确克隆到杆状病毒载体上,重组病毒可在昆虫细胞中表达目的蛋白.
    통과설계특이인물,확증획득구제역병독3ABC편마구적목적기인편단,장기용Sal Ⅰ화Nco Ⅰ쌍매절후,여경동양처리적대유일단신호태서렬적천사질립pMelBac-B련접,경사선、감정급DNA서렬분석후,획득중조질립pMel-3ABC.장중조질립여선성화적간상병독골가Bac-N-Blue공전염Sf9곤충세포,통과서반사선화PCR감정,획득료함유목적기인적중조간상병독.용중조병독감염Sf9곤충세포,통과간접ELISA 방법,검측세포배양기상청액중표체적구제역병독항원.결과표명,구제역병독기인편단3ABC정학극륭도간상병독재체상,중조병독가재곤충세포중표체목적단백.
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